Аннотация результатов, полученных в 2019 году
Глобальной целью настоящего проекта является разработка стратегии, направленной на улучшение рецептивных свойств эндометрия, которая при последующей клинической адаптации может быть использована для решения ряда конкретных проблем в области вспомогательных репродуктивных технологий и лечения женского бесплодия, включая повышение эффективности циклов ЭКО и снижение процента женщин, страдающих привычными невынашиваниями беременности. Фундаментальную основу разрабатываемого подхода составляет гипотеза о негативном влиянии клеточного старения эндометриальных стромальных клеток (эСК) на процессы децидуализации и имплантации и вытекающее из этой гипотезы предположение о том, что таргетная элиминация стареющих эСК может способствовать восстановлению рецептивных свойств эндометрия. Предлагаемая концепция была сформулирована на основании тщательного анализа современной литературы, и логика ее «рождения» достаточно полно отражена в нашем обзоре, опубликованном в рамках выполнения настоящего проекта (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31728580). Работа первого года была направлена на верификацию основополагающего тезиса о существовании взаимосвязи между клеточным старением и децидуализацией эСК. Мы предположили несколько механизмов негативного влияния стареющих эСК на децидуализацию эндометрия. Во-первых, децидуальная дифференцировка самих старых клеток может быть нарушена. Во-вторых, присутствуя в ткани эндометрия, стареющие эСК могут отрицательно влиять на дифференцировку соседних молодых клеток как через межклеточные контакты, так и за счет секретируемых факторов, включая активные формы кислорода. На начальном этапе исследования мы продемонстрировали, что стареющие эСК не способны адекватно реагировать на индукцию децидуальной дифференцировки. В частности, мы показали, что при запуске дифференцировки стареющие эСК не экспрессировали Е-кадгерин и не претерпевали характерного для децидуализации изменения морфологии с фибробластоподобной на эпителиоподобную, что свидетельствует о нарушении мезенхимально-эпителиального перехода. Более того, индукция дифференцировки в стареющих эСК не приводила к усилению экспрессии транскрипционного фактора FOXO1 и генов-маркеров децидуальной дифференцировки – пролактина и IGFBP1. Соответственно, последующая секреция белков пролактина и IGFBP1 также была снижена. Важно, что в стареющих эСК в ответ на гормональные стимулы мы не выявили усиления экспрессии прогестеронового и эстрагенового рецепторов, которые обуславливают восприимчивость стромы эндометрия к действию стероидных гормонов. Также мы обнаружили, что в старых клетках, в отличие от контрольных, в ответ на индукцию децидуализации рецептор прогестерона не транслоцируется в ядро, где в норме он служит платформой для сборки транскрипционных факторов и, связываясь с промоторными областями децидуальных генов, обуславливает инициацию их транскрипции. Полученные результаты свидетельствуют о нарушенной способности старых эСК к децидуальной дифференцировке. Кроме того, эти данные позволяют предположить, что неспособность старых эСК адекватно реагировать на децидуальные стимулы, по крайней мере частично, обусловлена сниженной восприимчивостью старых клеток к действию стероидных гормонов. С одной стороны, это происходит из-за недостаточной экспрессии прогестеронового и эстрагенового рецепторов, а с другой стороны, ввиду того, что рецептор прогестерона не перемещается в ядро, что, в свою очередь, негативно регулирует транскрипцию ключевых децидуальных генов – пролактина и IGFBP1. Для более глубокого представления о возможных молекулярных механизмах нарушения децидуальной дифференцировки эСК при старении нами был проведен полнотранскриптомный анализ. Для первичной оценки мы провели глобальное сравнение всех образцов при помощи иерархической кластеризации матрицы дистанций между образцами и анализа главных компонент. Такое представление данных позволило выявить отчетливую разницу между паттернами экспрессии в молодых и старых эСК как до индукции дифференцировки, так и на 4 и 8 сутки децидуализации. Судя по сдвигу паттернов экспрессии, можно сделать однозначный вывод – в ответ на действие гормонов старые эСК претерпевают изменения, однако эти изменения значительно менее выражены, чем в контрольных эСК. Анализ дифференциальной экспрессии генов в молодых и старых эСК на 8 день после индукции дифференцировки выявил статистически значимые отличия в экспрессии более чем 3 000 генов (Wald test p-value < 0.05, BH p.adj < 0.1), из них 1674 были up-регулированы, а 1636 down-регулированы в старых клетках относительно молодых. Важно, что среди генов, down-регулированных в старых эСК на 8 день дифференцировки, мы обнаружили ключевые гены децидуальных клеток, включая пролактин и IGFBP1, LEFTY2, IL11, SCARA5, CLU. В тоже время, среди up-регулированных генов мы выявили ген CDKN1A, обуславливающий блок клеточного цикла в старых эСК, гены, кодирующие экспрессию важнейших SASP-компонентов и белков экстраклеточного матрикса MMP3, MMP12, CCL2, CCL7, COL12A1, COL8A1, COL27A1, COL8A2, а также новый маркер старения DPP4. Функциональная аннтоация генов, up-регулированных в стареющих эСК, на 8 день дифференцировки выявила активацию сигнальных путей, связанных с организацией экстраклеточного матрикса, регуляцией пролиферации эпителиальных клеток, регуляцией клеточной адгезии и хемотаксиса. Полученные результаты однозначно свидетельствуют в пользу нарушенной способности стареющих эСК к децидуальной дифференцировке и позволяют предполагать, что старые клетки могут влиять на аттракцию и проникновение маточных натуральных киллеров в строму эндометрия, а также могут нарушать имплантацию бластоцисты, влияя на ее оппозицию, адгезию и инвазию. Соответственно, присутствие стареющих эСК в строме эндометрия может приводить к нарушению рецептивности ткани. Согласно нашему предположению, сниженная способность стареющих эСК дифференцироваться в децидуальном направлении может быть не единственным последствием их присутствия в ткани эндометрия. Для подтверждения этой идеи мы оценили вклад предсуществующих в клеточной популяции старых эСК в динамику децидуализации контрольных клеток. Для удобства анализа децидуального ответа клеток мы разработали специальную генетически-кодируемую репортерную систему. При помощи молекулярного клонирования мы заменили последовательность UbC промотора в backbone лентивекторе pUltra-Hot (https://www.addgene.org/24130/) на амплифицированный с геномной ДНК фрагмент дистального промотора гена пролактина. Необходимо отметить, что клонированная последовательность содержит в себе особый транспозон MER20, который локализован в промоторных областях не только пролактина, но и множества других генов, участвующих в регуляции децидуального ответа эндометрия. Таким образом, созданная нами репортерная система позволяет оценивать некий интегральный децидуальный ответ эСК по флуоресценции mCherry. Для последующей работы при помощи лентивирусной трансдукции мы получили линии генетически-модифицированных эСК, стабильно экспрессирующих PRL-mCherry трансген. Важно, что для определения вирусного титра мы воспользовались подходом геномного функционального титрования при помощи ПЦР в реальном времени, что позволило нам получить генетически-модифицированные линии эСК с эквивалентным количеством интеграций таргетной последовательности в геном. Используя PRL-mCherry конструкцию, мы оценили влияние предсуществующих стареющих эСК на децидуализацию контрольных клеток в 2D и 3D условиях культивирования. Мы показали, что предсуществующие стареющие эСК негативно влияют на дифференцировку молодых клеток, о чем свидетельствовало снижение уровня флуоресценции mCherry в молодых дифференцирующихся эСК, ко-культивировавшихся со старыми клетками. Причем негативное влияние, выявленное при ко-культивировании молодых и старых клеток в монослое (2D условия), оказалось еще более выраженным при ко-культивировании клеток в состоянии сфероидов (3D условия). Таким образом, нам удалось обнаружить еще один механизм взаимосвязи между клеточным старением и децидуализацией эСК, а именно мы подтвердили, что, присутствуя в ткани эндометрия, старые эСК могут негативно влиять на дифференцировку «здоровых» клеток микроокружения. Наряду с сохранением жизнеспособности и метаболической активности старые клетки характеризуются также и высокой секреторной активностью. При этом состав факторов, которые продуцируют старые клетки (senescence-associated secretory phenotype, SASP), существенно отличается от такового в контрольных клетках (https://www.aging-us.com/article/102441/text). Согласно нашему предположению, измененная секреторная активность может быть еще одним механизмом реализации негативного влияния стареющих эСК на децидуализацию контрольных клеток. Для проверки этой гипотезы мы оценили ключевые параметры децидуальной дифференцировки эСК при культивировании в среде, содержащей факторы, секретированные стареющими эСК. Согласно нашим ожиданиям, в присутствии SASP-факторов мы не наблюдали необходимого изменения фибробластоподобной морфологии на эпителиоподобную, более того, мы обнаружили сниженную экспрессию FOXO1 и IGFBP1. Используя эСК, экспрессирующие PRL-mCherry, мы показали, что при индукции дифференцировки в среде, содержащей SASP-факторы, уровень экспрессии пролактина был заметно ниже, о чем свидетельствовало уменьшение интенсивности флуоресценции mCherry. Еще одним важнейшим компонентом, продуцируемым стареющими клетками, является внеклеточный матрикс (ВКМ), состав и жесткость которого также существенно меняются при старении клеток. Мы дополнительно проанализировали влияние компонентов ВКМ от старых клеток на дифференцировку молодых эСК. Для этого мы высевали эСК, экспрессирующие PRL-mCherry, на децеллюляризированный матрикс контрольных или старых эСК и оценивали децидуальную реакцию клеток. При индукции дифференцировки на ВКМ от старых клеток мы наблюдали снижение флуоресцентного сигнала в эСК, что свидетельствует о нарушении децидуальной дифференцировки. Помимо белков, микроРНК и экстраклеточных везикул стареющие клетки могут также секретировать активные формы кислорода (АФК). В связи с этим мы проверили еще одно предположение: могут ли стареющие эСК, продуцирующие и секретирующие повышенные количества АФК, сдвигать физиологически релевантный редокс-баланс в молодых эСК и нарушать таким образом их способность к децидуализации. В первую очередь, используя флуоресцентный краситель H2DCF-DA, мы показали, что стареющие эСК действительно характеризуются повышенным уровнем внутриклеточных АФК, причем как в нативном состоянии, так и после индукции децидуальной дифференцировки. Используя генетически-модифицированные эСК, экспрессирующие биосенсор пероксида водорода HyPer, мы показали, что в ответ на индукцию дифференцировки уровень Н2О2 в старых клетках был существенно выше, чем в контрольных клетках. Далее при помощи Amplex Red мы установили, что стареющие эСК экскретируют во внеклеточное пространство заметно большие количества Н2О2, чем контрольные клетки. И, наконец, мы выявили рост уровня внутриклеточного Н2О2 в процессе дифференцировки молодых HyPer-экспрессирующих эСК при их ко-культивировании со старыми клетками. Эти результаты наряду с данными, описанными выше, демонстрирующими снижение дифференцировочной способности молодых эСК при ко-культивировании со старыми клетками, подтверждают, что пероксид водорода, продуцируемый и секретируемый стареющими эСК, может проникать в соседние молодые эСК и, по крайней мере частично, обуславливать негативное влияние стареющих эСК на децидуализацию молодых клеток. Таким образом, научные результаты, полученные за отчетный период, однозначно свидетельствуют о негативном влиянии стареющих эСК на децидуализацию стромального компартмента эндометрия и демонстрируют перспективность предлагаемого подхода восстановления рецептивности эндометрия посредством таргетной элиминации этих клеток.

Аннотация результатов, полученных в 2020 году
Фундаментальная цель настоящего проекта заключается в изучении роли старения эндометриальных стромальных клеток (эСК) в функционировании ткани эндометрия, в частности, в процессах децидуализации и имплантации. Представление о том, что такое клеточное старение и какова его роль на тканевом, органном и организменном уровнях, можно получить из небольшого анимационного видеоролика, подготовленного с участием А.В. Бородкиной в рамках проекта «ПРОСТО. Генетика», осуществляемого Министерством высшего образования и науки РФ (https://www.youtube.com/watch?v=1OnRqIFZyEA&t=1s). Также небольшой фрагмент о работе А.В. Бородкиной в области клеточного старения можно найти в специальном выпуске программы «Доброе утро» («Женщины в науке») на Первом канале (https://www.1tv.ru/shows/dobroe-utro/reportazh/zhenshiny-v-nauke-dobroe-utro-fragment-vypuska-ot-16-03-2021). Исходя из сути феномена клеточного старения, мы предполагаем, что стареющие эСК могут негативно влиять на нормальное функционирование ткани эндометрия. В случае если наша гипотеза получит экспериментальное подтверждение, мы планируем использовать сенолитики для таргетной элиминации стареющих клеток с целью восстановления рецептивных свойств эндометрия. При последующей клинической адаптации такой подход может быть использован для решения ряда конкретных проблем в области вспомогательных репродуктивных технологий и лечения женского бесплодия, включая повышение эффективности циклов ЭКО и снижение процента женщин, страдающих привычными невынашиваниями беременности. В очень сжатой и доступной форме суть нашего предположения изложена на сайте ТАСС в разделе «Наука» (https://nauka.tass.ru/nauka/11065523). При реализации задач первого года мы экспериментально установили, что старение эСК может негативно сказываться на процессе децидуализации. Так, мы показали, что сами стареющие клетки утрачивают способность децидуализироваться при действии гормональных стимулов. Более того, стареющие эСК могут негативно влиять на функционирование молодых клеток микроокружения, вызывая в молодых клетках паракринное старение и/или непосредственно нарушая их децидуализацию. Важно, что негативное влияние стареющих эСК на микроокружение может оказываться как локально, при формировании клеточных контактов, так и на некотором удалении, за счет паракринного влияния растворимых факторов, которые они секретируют. Установив факт и изучив механизмы негативного влияния стареющих эСК на децидуализацию, в текущем году мы перешли к следующему этапу исследования. В норме децидуализация обуславливает успешное протекание одного из важнейших ранних этапов беременности – имплантации. При имплантации децидуализирующиеся эСК вступают в активное взаимодействие с трофоэктодермой бластоцисты. В связи с этим, одной из основных задач этого года было исследование влияния стареющих эСК на различные этапы имплантации. С этой целью мы разработали in vitro модель имплантации, основанную на ко-культивировании децидуализирующихся молодых или старых эСК и клеток хориокарциномы человека линии BeWo b30, которые близки по своим свойствам к клеткам трофэктодермы. В первую очередь, оценивая миграционные свойства клеток, мы показали, что стареющие эСК могут негативно влиять на оппозицию бластоцисты, другими словами, за счет измененной секреторной активности стареющие эСК могут нарушать ориентацию бластоцисты в полости матки относительно ткани эндометрия. Далее мы проанализировали влияние стареющих эСК на адгезию и инвазию модельных бластоцист, сформированных из BeWo клеток. Мы обнаружили, что стареющие эСК нарушают нормальное протекание также и этих этапов имплантации. Суммируя результаты, полученные при реализации этой задачи, мы показали, что стареющие эСК могут отрицательно влиять не только на децидуализацию ткани эндометрия, но и негативно сказываться непосредственно на процессе имплантации бластоцисты. Интересно, что предпосылки для этих экспериментальных результатов были предварительно получены нами in silico в процессе сравнительного анализа транскриптомов молодых и старых эСК, свидетельствующего о существенной модуляции процессов организации экстраклеточного матрикса, сопровождающих децидуализацию стареющих эСК. Получив подтверждение нашей гипотезы в экспериментах in vitro, в рамках второй задачи этого года мы перешли к разработке релевантных in vivo моделей. Во-первых, нам необходимо было смоделировать децидуализацию на мышиной модели. Стоит отметить, что это является весьма нетривиальной задачей, поскольку физиология эндометрия грызунов и человека существенно отличается. Так, для грызунов, как для большинства млекопитающих, характерен не менструальный, а эстральный цикл, состоящий 4 фаз: проэструса, эструса, метэструса, диэструса. Именно в фазе эструса происходит овуляция и грызуны способны к проявлению половой активности. Важно, что децидуальная трансформация эндометрия у мышей запускается только после наступления беременности и имплантации бластоцисты в толщу эндометрия, тогда как у человека такая трансформация происходит в каждом цикле и не зависит от имплантации. Таким образом, для создания релевантной модели децидуализации in vivo нам необходимо было последовательно сымитировать спаривание, оплодотворение и имплантацию. Для индукции псевдобеременности у животных в фазе эструс мы проводили раздражение влагалища мыши электрическим током. Затем при помощи введения шелковой прошивной нити в полость матки имитировали повреждение эндометрия при имплантации эмбриона и, таким образом, запускали децидуализацию эндометрия. В результате этих манипуляций мы детектировали значительное увеличение рогов матки при макроскопическом исследовании, признаки децидуальной трансформации эндометрия мыши при гистологическом исследовании и существенное повышение экспрессии ключевого гена-маркера децидуализации PRL. Таким образом, в ходе реализации этой задачи нам удалось разработать in vivo модель децидуализации. На следующем этапе мы перешли к созданию мышиной модели повреждения эндометрия. Согласно нашему предположению, в результате повреждения в эндометрии могут появиться стареющие эСК, которые, в свою очередь, будут негативно сказываться на последующем протекании децидуализации и имплантации. Повреждение эндометрия осуществляли пульсовым введением этанола в один из рогов матки. Для последующего анализа децидуальной реакции поврежденного таким образом эндометрия через 14 дней после повреждения у животных производили индукцию псевдобеременности и децидуализацию эндометрия описанным выше способом. Методами морфологического и гистологического исследования мы показали, что в роге, в котором проводилось повреждение этанолом, децидуальная реакция проявляется значительно слабее, чем в контрольном. Кроме того, спаривание самок через 14 дней после повреждения эндометрия показало уменьшение количества плодов в поврежденном роге матки, что свидетельствует о нарушении процесса имплантации. Таким образом, нам удалось смоделировать повреждение ткани эндометрия, приводящее к нарушению децидуализации и имплантации. Для верификации нарушенной децидуализации в поврежденном роге дополнительно мы продемонстрировали, что уровень экспрессии PRL при децидуализации поврежденного рога был существенно ниже, чем таковой в контрольном роге. И, наконец, мы обнаружили увеличение экспрессии генов-маркеров стареющих клеток CDKN2A, CDKN2B и IL6 в поврежденном роге. Полученные результаты свидетельствуют в пользу появления стареющих клеток в созданной нами мышиной модели нарушенной децидуализации. Также в рамках текущего периода нам удалось предложить клиническую адаптацию генетически-кодируемой репортерной системы для оценки эффективности децидуальной реакции, разработанной нами в прошлом году. А именно, мы предложили использовать созданную нами конструкцию для пациент-специфического подбора прогестагенов для поддержки лютеиновой фазы в протоколе ЭКО. Такой персонализированный подход может в перспективе повысить шансы успешной имплантации и, соответственно, эффективность циклов ЭКО. Подробное описание фундаментальной основы разработанной генетической конструкции и деталей возможной клинической адаптации созданной тест-системы представлены в нашей статье, опубликованной в текущем году (https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fcell.2021.624053/full). Таким образом, научные результаты, полученные за отчетный период, свидетельствуют о негативном влиянии стареющих эСК на процесс имплантации и подчеркивают целесообразность предлагаемого подхода восстановления рецептивности эндометрия посредством таргетной элиминации этих клеток.

Аннотация результатов, полученных в 2021 году
Настоящий проект нацелен на разработку совершенно новой стратегии, направленной на улучшение рецептивных свойств эндометрия посредством таргетной элиминации стареющих эндометриальных стромальных клеток (эСК). В работе первых двух лет мы экспериментально подтвердили факт негативного влияния стареющих эСК на функционирование эндометриальной стромы. В частности, мы показали, что стареющие эСК утрачивают способность адекватно реагировать на гормональную стимуляцию, что обуславливает нарушение их тканеспецифичной децидуальной трансформации. Более того, присутствие стареющих клеток может нарушать децидуализацию соседних здоровых клеток микроокружения. Важно, что полноценная децидуальная трансформация функционального слоя эндометрия является критически важной для успешной имплантации эмбриона в ткань эндометрия. И, действительно, используя модель имплантации in vitro, мы продемонстрировали, что присутствие стареющих эСК негативно влияет на оппозицию, адгезию и инвазию модельных бластоцист. Также в рамках предыдущих периодов нам удалось разработать релевантные in vivo модели, в том числе модель повреждения эндометрия, которая, с одной стороны, характеризовалась нарушениями децидуализации и имплантации, а с другой, повышенной экспрессией маркеров клеточного старения. Таким образом, результаты, полученные в предыдущие периоды, экспериментально подтверждают негативное влияние стареющих эСК на функционирование эндометрия и свидетельствуют о целесообразности предлагаемого подхода восстановления рецептивности эндометрия посредством таргетной элиминации стареющих клеток, что и явилось ключевой задачей текущего года. В качестве подхода для направленного удаления стареющих эСК предполагалось использовать FOXO4-пептид. Этот пептид относят к классу соединений с сенолитической активностью, то есть способных таргетно индуцировать апоптоз в стареющих клетках. Однако, оказалось, что в отношении стареющих эСК FOXO4-пептид не проявляет сенолитических свойств, другими словами это соединение вызывало неселективную гибель как контрольных, так и стареющих эСК. Более того, мы протестировали ряд других соединений, так же относящихся к сенолитикам широкого спектра действия (кверцетин, оуабаин, буфалин) и получили аналогичный результат – ни одно из протестированных соединений не оказывало сенолитического действия на стареющие эСК. Для того чтобы разобраться с молекулярными причинами отсутствия сенолизиса в эСК, нами была проведена дополнительная исследовательская работа, результаты которой опубликованы в журнале Cellular and Molecular Life Sciences (https://doi.org/10.1007/s00018-021-03980-x). В рамках этой работы мы показали, что и другие типы мезенхимальных стромальных клеток (МСК) являются нечувствительными к действию сенолитиков. При помощи продвинутого биоинформатического анализа нам удалось выявить фундаментальные отличия в процессах старения клеток разного типа. А именно, мы обнаружили, что клетки чувствительные к сенолизису при старении приобретают проапоптотический профиль, тогда как клетки устойчивые к сенолизису, такие как эСК и другие типы МСК, при старении наоборот приобретают выраженный антиапоптотический профиль. Раскрыв таким образом молекулярные причины отсутствия сенолизиса в стареющих эСК, мы пришли к заключению, что попытка направленного удаления стареющих эСК при помощи уже существующих сенолитических соединений с известными механизмами действия, так или иначе направленными на индукцию апоптоза, является нецелесообразной. Исходя из полученных нами данных, для направленного удаления стареющих эСК требуется разработать новый подход для поиска соединений, способных обеспечить их высокоспецифичный сенолизис, что однако выходит за рамки задач настоящего проекта. Принимая во внимание полученные данные, нами была предложена альтернативная стратегия для восстановления рецептивных свойств эндометрия, основанная на частичной отмене фенотипических проявлений старения клеток, а именно на использовании сеноморфиков. В отличие от сенолитиков, сеноморфики не влияют на жизнеспособность стареющих клеток, однако оказывают воздействие на их фенотип и уменьшают секрецию SASP факторов. И, действительно, мы обнаружили, что применение таких сеноморфиков как метформин и рапамицин позволило частично обратить фенотип стареющих эСК, о чем свидетельствовало снижение ассоциированной со старением активности бета-галактозидазы, уменьшение клеточной гипертрофии и автофлуоресценции (https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2021.07.19.452880v1). Более того, оказалось, что предварительная обработка стареющих эСК метформином частично отменяла их негативное влияние на децидуализацию контрольных клеток в моделях ко-культивирования и на имплантацию модельных бластоцист, что подтверждает возможность восстановления рецептивных свойств поврежденного эндометрия посредством уменьшения выраженности фенотипа стареющих эСК при действии сеноморфиков, по крайней мере, в условиях in vitro (https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2021.07.19.452880v1). На заключительном этапе исследования мы валидировали полученные результаты на созданной нами in vivo модели повреждения эндометрия. Мы показали, что внутрибрюшинное введение метформина после повреждения эндометрия способствовало заметному увеличению количества плодов в рогах матки экспериментальных животных по сравнению с контрольной группой животных, которым вводили физиологический раствор. Эти результаты однозначно свидетельствуют в пользу значительного улучшения рецептивных свойств эндометрия при помощи сеноморфиков. Суммируя результаты, полученные за отчетный период, можно заключить, что использование сеноморфиков, снижающих фенотипические проявления стареющих эСК, может рассматриваться как перспективная стратегия для восстановления рецептивных свойств эндометрия, которая при последующей клинической адаптации может быть использована для решения ряда конкретных проблем в области вспомогательных репродуктивных технологий и лечения женского бесплодия, включая повышение эффективности циклов ЭКО и снижение процента женщин страдающих многократными неудачами имплантации. Необходимо подчеркнуть, что использование сенолитиков, способных направленно удалять стареющие эСК, может приводить к еще более выраженному положительному влиянию на функционирование эндометрия, так как позволит не просто уменьшить фенотипические проявления клеточного старения, но и удалить такие дефектные клетки из ткани, что делает задачу поиска и разработки высокоспецифичных сенолитиков для эСК крайне актуальной.