КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер 18-15-00165

НазваниеСовременные клинико-морфологические и иммунобиологические аспекты генитального эндометриоза

РуководительАдамян Лейла Вагоевна, Доктор медицинских наук

Организация финансирования, регион Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Российский университет медицины" Министерства здравоохранения Российской Федерации, г Москва

Период выполнения при поддержке РНФ 2018 г. - 2020 г. 

Конкурс№28 - Конкурс 2018 года «Проведение фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований отдельными научными группами».

Область знания, основной код классификатора 05 - Фундаментальные исследования для медицины, 05-221 - Акушерство и гинекология

Ключевые словарепродуктивная медицина, гинекология, хирургия, эндометриоз, тазовая боль, качество жизни, иммуноморфология

Код ГРНТИ76.00.00


СтатусУспешно завершен


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
Генитальный эндометриоз остается широко распространенным заболеванием, частота которого значительно возросла в последние годы. В структуре гинекологических заболеваний эндометриоз прочно удерживает третье место после воспалительных заболеваний женской половой сферы и миомы матки, и является одной из причин, вызывающих болевой синдром, нарушения менструальной, репродуктивной функции женщин (Адамян Л.В. и др., 2013, 2016; Trealoar S.A. et al., 2008). Эндометриоз характеризуется такими тяжелыми симптомами как хроническая тазовая боль, боль во время менструации, диспареуния (боль во время полового акта), дисхезия (затрудненные и болезненные дефекации) и в 30% случаев приводит к бесплодию. Каждая 10-я женщина в мире страдает от эндометриоза, что составляет более 176 миллионов женщин по всему миру в возрасте от 15 до 49 лет (World Population Projection Tables by Country and Group, 2010). Таким образом эндометриоз перестает быть только медицинской проблемой, приобретая все более выраженное социальное значение (Адамян Л.В. и др., 2015; Сонова М.М., 2009). Недостаточная эффективность лечения генитального эндометриоза связана с невыясненными до конца механизмами развития заболевания. Хирургическим методом, являющимся единственно реальным, не всегда удается восстановить специфические функции женского организма, а медикаментозное лечение более чем за полувековой период развеяло все надежды на полное выздоровление в связи с высокой частотой рецидивов, резистентностью различных клинических форм, а также серьезными побочными эффектами. Причины возникновения, методы диагностики и лечения являются дискуссионными с момента описания генитального эндометриоза и до настоящего времени. Однако ученые сходятся во мнении, что заболевание носит мультифакториальный характер. Этими факторами могут быть генетические, эндокринные, иммунные, неблагоприятные экологические условия и т.д. Последние могут провоцировать патологические эффекты мутантных генов и способствовать развитию эндометриоза. Патогенетические механизмы, лежащие в основе тазовой боли при эндометриозе, также недостаточно понятны. Возникновение боли при эндометриозе связывают с феноменом микроменструаций, аллогенным воздействием медиаторов воспаления, спаечным процессом в малом тазу и поражением невральных структур. Стойкий болевой синдром при эндометриозе может быть обусловлен присоединением нейропатического болевого компонента. С этой точки зрения заслуживает внимания рассмотрение комплекса факторов, способствующих развитию и хронизации тазовой боли при эндометриозе, что имеет ключевое значение для выбора тактики ведения больных. Несмотря на большой интерес к проблеме эндометриоза, в настоящее время не существует как единой теории этиологии и патогенеза эндометриоза, так и эффективных биомаркеров для диагностики данного заболевания. «Золотым стандартом» диагностики является лапароскопия. Но из-за неспецифичности симптомов, постановка диагноза значительно задерживается и занимает 6-11 лет (по данным статистики разных стран). Поэтому разработка малоинвазивных методов ранней диагностики эндометриоза представляется весьма актуальной, что и является одной из задач планируемого исследования. Впервые предполагается многокомпонентное клинико-морфологическое, молекулярно-биологическое изучение патогенеза наиболее распространенных форм генитального эндометриоза. Кроме того, предполагается провести детальный анализ болевого синдрома, выявить структурные изменения нервов и нервных окончаний, установить особенности нейрорегуляции и экспрессии нейромедиаторов в очагах эндометриоза. На основании полученных данных будет разработан современный алгоритм ранней диагностики и комплексного лечения генитального эндометриоза с учетом эффективных биомаркеров мониторинга заболевания. Представленный проект направлен на совершенствование диагностики, лечения и реабилитации больных эндометриозом с применением новейших высокотехнологичных методов для укрепления репродуктивного здоровья, снижения репродуктивных потерь, повышения уровня трудовой и социальной адаптации. Реализация проекта внесет вклад в повышение демографического потенциала страны.

Ожидаемые результаты
Проект предусматривает исследование молекулярных и генетических аспектов эндометриоза, определение дифференциально экспрессируемых генов, концентрации циркулирующих микроРНК, установление сигнальных путей, задействованных в развитии эндометриоза, изучение транскриптомного профиля клеток эндометрия с целью выявления и внедрения малоинвазивных диагностических тестов, что позволит избежать колоссальных затрат на длительную диагностику заболевания. Будут изучены факторы, способствующие развитию и хронизации боли при эндометриозе, особенности клинической картины болевого синдрома, проведен анализ функциональных расстройств в ноцицептивной системе, исследованы морфологические предпосылки развития боли, что позволит расширить представления о патогенетических механизмах хронического болевого синдрома при эндометриозе и наметить пути преодоления данной проблемы. В результате реализации проекта ожидается повышение эффективности лечения тазовых болей и улучшение качества жизни у больных эндометриозом с учетом клинико-патогенетических, иммунологических, психоэмоциональных особенностей развития болевого синдрома. Выполнение проекта подразумевает дальнейшую оптимизацию диагностики эндометриоза путем разработки и внедрения малоинвазивных методов раннего выявления информативных биомаркеров заболевания, биохимических, иммуногистохимических маркеров мониторинга активности процесса. Ожидается реализация возможности обследования больных эндометриозом с использованием высокоинформативных методов визуализации и эндоскопии. Предполагается выявление перспективных патогенетически обоснованных направлений дифференцированной терапии больных разных возрастных групп, совершенствование существующих и разработка новых неинвазивных лечебных методик, минимально инвазивных хирургических доступов, технологий, основанных на применении новых энергий, вспомогательных репродуктивных технологий. Результаты внедрения проекта позволят расширить спектр оказания специализированной медицинской помощи женщинам, больным эндометриозом. Возрастет число больных, которым будет предложено хирургическое лечение с применением минимально инвазивных эндоскопических технологий в объеме не радикального, а органосохраняющего вмешательства. Снижение травматичности хирургического лечения приведет к сокращению пребывания больных в стационаре, полноценной социальной и медицинской реабилитации больных. Достигнутые результаты позволят выработать четкий алгоритм и стандарты ведения больных эндометриозом, что ограничит назначение неадекватных лечебно-диагностических процедур, сократит сроки лечения, продолжительность временной нетрудоспособности, снизит стоимость лечения. Указанные характеристики обеспечат доступность и ценовую приемлемость высокотехнологичных видов медицинской помощи в лечебных учреждениях страны.


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ


Аннотация результатов, полученных в 2018 году
За отчетный период проведен анализ мировой литературы по изучаемой проблеме, представлена клинико-лабораторная характеристика более 200 больных различными формами эндометриоза и получены некоторые промежуточные результаты. Актуальность изучения данного заболевания связана с возрастающей частотой эндометриоза, склонностью к рецидивам и хронизации процесса, увеличением числа наблюдений бесплодия при эндометриозе, необходимостью постоянного контроля и длительностью лечения, формированием стойкого болевого синдрома при некоторых формах наружного генитального эндометриоза, существенно снижающего качество жизни больных. Проведено изучение качества жизни 140 пациенток с эндометриозом с помощью разработанного нами специального опросника «Профиль здоровья больных с эндометриозом», а также Визуальной аналоговой шкалы (ВАШ). Констатирована высокая интенсивность болевого синдрома у женщин - 39,73±18,23 и 39,53±19,2 по шкале ВАШ. Отмечены выраженная дисменорея 40±0,1, выраженная диспареуния 57,41±0,2, высокая интенсивность хронической тазовой боли 39,01±0,1. По всем параметрам опросника выявлено выраженное негативное влияние заболевания на качество жизни больных в виде недомогания, снижения жизненной активности и эмоционального состояния, нарушения межличностных отношений, отношений с детьми, сексуальных отношений, крайне низкой самооценки (38,67±28,31), снижения работоспособности. Для выявления и изучения новых аспектов патогенеза эндометриоза на молекулярном уровне нами исследованы образцы эутопического и эктопического эндометрия у 50 пациенток репродуктивного и предменопаузального возраста с разными формами аденомиоза. Результаты гистологического исследования показали, что как при диффузной форме аденомиоза тела матки, так и при аденомиомах у женщин репродуктивного возраста граница эндометрия с миометрием неровная, «зубчатая» за счет множественных очагов врастания стромального и железистого компонентов базального слоя эндометрия в миометрий и пучков субэндометриального слоя миометрия в эндометрий. Результаты иммуногистохимического исследования выявили многократное, в 3-8,5 раза, по сравнению с группой сравнения повышение экспрессии моэзина, РАК 4, ММР 2 и MMP 9 в эпителии и стромальных клетках не только в эктопических эндометриоидных очагах при аденомиозе и аденомиомах, но и в базальном слое эутопического эндометрия. Достоверной разницы в экспрессии изученных ферментов между эутопическим базальным слоем эндометрия и эктопическими очагами как при аденомиозе, так и при аденомиомах не обнаружено, как и между эктопическими эндометриоидными очагами при аденомиозе и аденомиомах. Однако выявлена тенденция к повышенной экспрессии изученных ферментов в миометрии, окружающем эктопические эндометриоидные очаги при аденомиозе, а также в миоцитах и строме аденомиом. Сделан вывод о том, что для разных форм аденомиоза (диффузной и аденомиом) характерна повышенная инвазивная активность базального слоя эндометрия с множественными очагами его врастания в миометрий. Не только эктопический эндометрий при разных формах аденомиоза, но и базальный слой эутопического эндометрия отличается многократно повышенной экспрессией ферментов, обеспечивающих высокую инвазивную активность клеток – моэзина, РАК 4, ММР 2 и ММР 9, а также увеличением в строме числа клеток с маркером стволовых (CD34+). Полученные данные свидетельствуют в пользу теории патогенеза аденомиоза вследствие инвазии эутопического эндометрия в миометрий. Также нами был проведен транскриптомный анализ образцов эутопического и эктопического эндометрия пациенток с эндометриозом и образцов эутопического эндометрия женщин, не имеющих данного заболевания. В исследование мы включили 6 пациенток с эндометриозом и 3 пациенток с несостоятельностью рубца на матке после кесарева сечения. Было выполнено профилирование 17 биологических образцов, из них 3 условно нормальных образца эндометрия, 6 образцов эутопического эндометрия от пациенток с эндометриозом и суммарно 8 образцов очагов эндометриоза. Сигналы проб снимали путем измерения электрохимических потенциалов реакций; дизайн микрочипов – это четыре подложки на одном чипе, суммарное число проб на каждой из подложек – 2240. Всего в ходе работы анализировали 2227 генов, проведены расчеты для 378 сигнальных путей. Превалирующая часть образцов очагов эндометриоза были сгруппированы вместе, а образцы нормального эндометрия не входили в данный кластер, что является свидетельством значительного различия между образцами нормального эндометрия пациенток без эндометриоза и образцами из очагов эндометриоза. Образцы эутопического и эктопического эндометрия показали очень высокое сходство в отношении профилей экспрессии генов в целом. При вычислении взаимосвязи по экспрессии генов и уровням активации внутриклеточных сигнальных путей для всех исследуемых образцов из очагов эндометриоза была отмечена в большинстве случаев сильная корреляция между образцами из различных очагов эндометриоза, независимо от локализации и принадлежности к конкретному пациенту. Корреляция между образцами эутопического и эктопического эндометрия значительно выше, чем корреляция эндометрия женщин, не имеющих эндометриоза, и образцами эутопического эндометрия от пациенток с эндометриозом. Полученные данные свидетельствуют о том, что молекулярные характеристики эндометриоидных очагов индивидуальны для каждой из пациенток и для различных очагов эндометриоза одной пациентки. Для обнаружения надежных биомаркеров и создания тест-системы, подходящей для диагностики эндометриоза вне зависимости от второстепенных факторов, на наш взгляд, необходимо проанализировать большую выборку пациенток и выявить гены и сигнальные пути, аберрантное действие которых не детерминировано фазой менструального цикла и стадией патологического процесса. Проведен также корреляционный анализ между уровнем межклеточной молекулы адгезии sICAM-1 и тяжестью перитонеального эндометриоза. В исследование включили 25 пациенток с наружным генитальным эндометриозом, которым было проведено хирургическое лечение, а диагноз был подтвержден гистологическим исследованием удаленных макропрепаратов. У 20 больных имел место эндометриоз 1-2 стадии, у 5 – 3-4 стадии. Контрольную группу составили 8 женщин, у которых при проведении диагностической лапароскопии по поводу бесплодия не было выявлено какой-либо патологии. Нами не было выявлено статистически значимой корреляции между стадией эндометриоза и уровнями sICAM-1 ни в сыворотке крови, ни в образцах перитонеальной жидкости. Средний уровень sICAM-1 у больных эндометриозом был достоверно выше, чем в контрольной группе. Однако в группе больных с бессимптомным вариантом течения эндометриоза значения этого показателя были достоверно ниже, чем в группах с болевым синдромом различной степени выраженности. Выявлено значительное повышение среднего уровня sICAM-1 в сыворотке крови в группах с болевым синдромом различной степени выраженности при 3-4 стадиях заболевания, по сравнению с группой пациенток с бессимптомным течением заболевания. При исследовании образцов перитонеальной жидкости выявлена прямая корреляция между тяжелым течением перитонеального эндометриоза (умеренный и выраженный болевой синдром) в сочетании с распространенным эндометриозом и повышением уровня sICAM-1. Полученные данные свидетельствуют о том, что растворимую форму межклеточной молекулы адгезии (sICAM-1) можно рассматривать в качестве дополнительного критерия активности наружного эндометриоза, а его повышенный уровень – как неблагоприятный фактор, свидетельствующий о прогрессировании заболевания. https://www.mediasphera.ru/issues/problemy-reproduktsii/2018/4/1102572172018041013 https://www.lvrach.ru/2018/11/15437142/

 

Публикации

1. Адамян Л.В, Арсланян К.Н., Харченко Э.И., Логинова О.Н. Что мы знаем сегодня об эндометриоидных кистах яичников? Проблемы репродукции, № 6, стр.77-81 (год публикации - 2018) https://doi.org/10.17116/repro20182406177

2. Адамян Л.В., Сонова М.М., Арсланян К.Н., Логинова О.Н. Современные методы оценки качества жизни больных с эндометриозом ( обзор литературы) Лечащий врач, № 11, стр. 70-73 (год публикации - 2018)

3. Адамян Л.В., Сонова М.М.,Логинова О.Н., Арсланян К.Н., Овакимян А.С., Ласкевич А.В., Скрябина Е.О. Роль межклеточной молекулы адгезии sICAM-1 в сыворотке крови и перитонеальной жидкости при наружном генитальном эндометриозе Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии, том 17, №5, с. 5–10 (год публикации - 2018) https://doi.org/10.20953/1726-1678-2018-5-5-10

4. Азнаурова Я.Б., Петров И.А., Сунцова М.В., Гаража А.В., Буздин А.А., Адамян А.А. Взаимосвязь экспрессии генов и степени активации сигнальных путей в эутопическом и эктопическом эндометрии пациенток с наружным генитальным эндометриозом Проблемы репродукции, том 24, страницы 13-21 (год публикации - 2018) https://doi.org/10.17116/repro20182404113

5. Зайратьянц О.В , Адамян Л.В., Манукян Л.М., Калинин Д.В., Арсланян К.Н. Экспрессия моэзина, p21-активированной киназы 4 (РАК 4), матриксных металлопротеиназ (MMP 2, MMP 9) и CD34 в эутопическом и эктопическом эндометрии при аденомиозе Архив патологии, № 6, 2018. стр. 14-21. (год публикации - 2018) https://doi.org/10.17116/patol20188006114


Аннотация результатов, полученных в 2019 году
За отчетный период продолжено клинико-лабораторное обследование больных эндометриозом, необходимое для научного обоснования современного алгоритма диагностики, профилактики и лечения. Одна из главных задач научного проекта заключается в изучении патогенеза хронической тазовой боли (ХТБ) при эндометриозе. Эндометриоз является наиболее частой причиной болевого синдрома у женщин разных возрастных групп. Изучение факторов, способствующих развитию и хронизации боли, особенностей клинической картины болевого синдрома, анализ функциональных расстройств в ноцицептивной системе могут позволить расширить представления о патогенетических механизмах хронического болевого синдрома при эндометриозе и наметить пути преодоления данной проблемы. Обобщены результаты обследования 260 пациенток с диагнозом наружного генитального эндометриоза. У 104 пациенток отмечался синдром хронической тазовой боли. Группу сравнения составили 33 пациентки, которым выполнялась лапароскопия по поводу доброкачественных образований яичников. Для проведения количественной оценки болевого синдрома, определения тяжести и интенсивности боли была использована Визуальная Аналоговая Шкала (ВАШ), представляющая градации боли от 0 (нет боли) до 10 баллов (нестерпимая боль). Для идентификации нейропатического компонента боли использовалась шкала Pain Detect. Дисменорея встречалась в 80% случаев, ациклические тазовые боли в 31% и диспареуния в 35,5% наблюдений. Оценка боли по ВАШ ≥ 7 баллов была ассоциирована с более тяжелыми стадиями (3-4 ст.) и глубокими формами эндометриоза. В группе сравнения болевой синдром по ВАШ в среднем составлял 3-4 балла. Клиническое описание болевого синдрома носило разнообразный характер. Чаще всего отмечались ноющие и тянущие боли (97%), тупые, распирающие боли (60%). Жалобы на «простреливающие» боли, подобные электрическому разряду отмечали 40% больных, «грызущие» боли наблюдались у 42%, жгучие у 8% пациенток. Иррадиацию боли отмечали 68% обследованных женщин. Эти жалобы могут быть косвенно связаны с формированием нейропатического компонента боли. На основании данных анкетирования по шкале Pain Detect результаты ≥19 баллов (вероятность нейропатического компонента высокая) выявлены у 40% больных, результаты <19 баллов (вероятность нейропатического компонента низкая) отмечались у 60% пациенток. 88% пациенток с «положительным ответом» по Pain Detect (≥19 баллов) имели глубокие формы наружного генитального эндометриоза и оценку боли по ВАШ ≥ 7 баллов. Важно отметить, что у 94% пациенток с глубокими формами инфильтративного эндометриоза наряду с характерными признаками по данным бимануального исследования, при УЗИ органов малого таза в первую фазу менструального цикла было выявлено увеличение количества жидкости в позадиматочном пространстве. Таким образом, пациентки с эндометриозом, оценкой боли по ВАШ≥7 баллов и ≥19 баллов по Pain Detect, наличием свободной жидкости в позадиматочном пространстве по УЗИ более 50 мл ассоциированы с инфильтративными формами эндометриоза. Сочетание этих признаков наряду с уровнем онкомаркера СА-125 более 63,73 Ед/мл прямо коррелирует с глубоким инфильтративным эндометриозом. Их использование полезно для выработки пред- и послеоперационной тактики ведения пациенток. Сильная корреляционная связь между оценкой боли по ВАШ и Pain Detect (r(s)=0,71, р<0,01) свидетельствует о том, что наличие именно нейропатического компонента боли влияет на выраженность болевого синдрома при наружном генитальном эндометриозе. Продолжение нашего исследования касалось изучения роли цитокинов перитонеальной жидкости в клинике генитального эндометриоза и хронической тазовой боли. Отправной точкой явилось понимание эндометриоза как перитонеального воспалительного процесса. Все пациентки с наружным генитальным эндометриозом (n=260) были разделены на 2 группы в зависимости от отсутствия или наличия болевого синдрома длительностью не менее 6 месяцев. После оперативного лечения назначали медикаментозную терапию: в группе без боли - диеногест, в группе с болевым синдромом - диеногест в сочетании с нестероидными противовоспалительными препаратами или с трициклическими антидепрессантами. Для исследования уровней факторов нейроангиогенеза (нейротрофический фактор головного мозга - BDNF, фактор роста нервов - NGF, сосудисто-эндотелиальный фактор роста - VEGF), онкомаркера крови (СА-125), молекул адгезии (sIСАМ-1) использовали иммуноферментный анализ. Результаты нашего исследования свидетельствуют о статистически значимом повышении средних уровней VEGF (СЭФР), СА-125, sICAM-1 в группах эндометриоза по сравнению с группой контроля. Выявлено значимое повышение средних уровней нейротрофинов у больных с хронической тазовой болью и эндометриозом на системном и локальном уровнях по сравнению с группой без боли и группой сравнения. Результаты корреляционного анализа показывают достоверную (р=0,006), сильную (r(s)=0,79) связь между стадией наружного генитального эндометриоза с тазовой болью более 7 баллов по ВАШ и СА-125 в сыворотке крови. Между СА-125 в сыворотке крови и положительным ответом (≥19 баллов) по шкале Pain Detect также отмечается достоверная корреляционная связь. Таким образом, сочетание этих признаков можно использовать в качестве важных клинических инструментов для разработки тактики пред- и послеоперационного ведения пациенток с глубоким инфильтративным эндометриозом. Также выявлено достоверное повышение уровня sICAM-1 при эндометриозе на локальном и системном уровнях по сравнению группой без эндометриоза. При этом уровень цитокина не меняется в зависимости от наличия или отсутствия болевого синдрома. Это подтверждает роль провоспалительных цитокинов как пускового механизма локальной гиперэстрогении в патогенезе заболевания. Однако со стадиями эндометриоза, как и с наличием боли уровень этого цитокина не коррелирует ни на системном, ни на локальном уровнях. Таким образом, при эндометриозе наряду с повышением провоспалительных цитокинов (sICAM-1), обнаружен рост экспрессии факторов нейроангиогенеза (BDNF, NGF, VEGF). Обращают на себя внимание не только значимые изменения нейроцитокинов в группе больных эндометриозом, но и, самое главное, выявленные статистически достоверные колебания уровня их экспрессии в зависимости от наличия боли, что подтверждает важный вклад нейроцитокинов в патогенез боли при этом заболевании. В отчетном году продолжена работа по транскриптомному анализу образцов эутопического и эктопического эндометрия пациенток с эндометриозом в рамках изучения генетических аспектов эндометриоза. В данное исследование были включены 12 пациенток с наружным генитальным эндометриозом и 7 пациенток с несостоятельностью рубца на матке после операции кесарева сечения. У каждой пациентки с эндометриозом было взято минимум два биологических образца: биоптат эутопического эндометрия и образец очага эндометриоза. В случае эндометриоза яичников в качестве исследуемых образцов были использованы фрагменты капсулы эндометриоидной кисты. Профилированы 44 биологических образца, измерены экспрессии 2227 генов для каждого биологического образца. На основании анализа генной экспрессии во всех исследуемых образцах эндометрия были выявлены значительные различия по экспрессии генов между образцами эутопического и эктопического эндометрия по отдельности при сравнении с условно нормальным эндометрием. В то же время сравнение эутопического и эктопического эндометрия пациенток с эндометриозом продемонстрировало лишь 4 дифференциально экспрессированных гена, что говорит о высокой схожести вышеуказанных образцов эндометрия. Расчеты силы активации сигнальных путей были проведены в соответствии с биоинформатическими методами. В рамках нашего исследования были проведены расчеты для 367 сигнальных путей. При сравнении образцов эутопического и эктопического эндометрия пациенток с эндометриозом выявлено 4 дифференциально-активированных сигнальных пути (p-value < 0,005): ILK signaling pathway (actin polymerization and cytoskeletal reorganization); ILK signaling pathway (cell motility); VEGF pathway (nitric oxide production); Ras pathway (RhoA pathway). Полученные данные свидетельствуют о том, что эктопический эндометрий в наибольшей степени похож на эутопический эндометрий тех же пациенток с эндометриозом, нежели на условно нормальный эндометрий. Таким образом, транскриптом эутопического эндометрия пациенток с эндометриозом может потенциально рассматриваться в качестве маркера наличия эктопических очагов. На основании результатов нашего исследования можно предположить молекулярную картину эндометриоза. Для обнаружения надежных биомаркеров и создания тест-системы, подходящей для диагностики эндометриоза независимо от второстепенных факторов, безусловно необходимо проанализировать большую выборку пациенток и выявить гены и сигнальные пути, аберрантное действие которых не ассоциировано с фазой менструального цикла и стадией патологического процесса. В рамках проекта в 2019 году нами также были проанализированы современные подходы к лечению больных при инфильтративных формах эндометриоза. Установлено, что при выборе объема оперативного вмешательства при распространенных формах эндометриоза следует придерживаться принципов реконструктивно-пластической органосохраняющей хирургии и прибегать к радикальным операциям только в тех случаях, когда исчерпаны все другие возможности. Окончательный выбор тактики ведения пациентки зависит от выраженности симптомов и стадии болезни, от возраста пациентки и необходимости наступления беременности. Оптимальной является следующая схема обследования и лечения тяжелых форм генитального эндометриоза: адекватная дооперационная диагностика (МРТ, ФКС, УЗИ, цистоскопия), адекватное периоперационное ведение согласно принципам fast-track хирургии, адекватная интраоперационная диагностика и адекватное оперативное вмешательство. Анализ наших данных показывает, что хирургическое лечение больных с инфильтративными формами эндометриоза с поражением смежных органов требует высокой квалификации врача, необходимости владения техникой операции на смежных органах ‒ кишечнике, мочевом пузыре, мочеточниках. В связи с этим наиболее целесообразно при подозрении на наличие тяжелых форм эндометриоза направление больных в специализированный профильный стационар ‒ учреждение III уровня оказания акушерско-гинекологической помощи. Полученные в 2019 году результаты включены в учебную программу сертификационного усовершенствования «Акушерство и гинекология (репродуктивная медицина и хирургия с курсом эндоскопии)», который реализуется на кафедре репродуктивной медицины и хирургии ФГБОУ ВО МГМСУ им. А.И. Евдокимова. Руководителем и членами научного коллектива организованы и проведены два международных конгресса, всероссийская научно-практическая конференция, в которых отдельные секции были посвящены обсуждению проблем эндометриоза. В отчетном 2019 году опубликованы шесть статей в журналах «Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии» (Scopus), «Проблемы репродукции» (Scopus, РИНЦ), «Лечащий врач» (РИНЦ) (прилагаются).

 

Публикации

1. Адамян Л.В, Сонова М.М., Арсланян К.Н., Логинова О.Н. Роль цитокинов в клинике наружного генитального эндометриоза и хронической тазовой боли Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии, №1, 2020 (год публикации - 2020)

2. Адамян Л.В., Арсланян К.Н., Сонова М.М., Харченко Э.И., Логинова О.Н., Ласкевич А.В, Гапарова А.А. Современные тенденции в хирургическом лечении инфильтративных форм эндометриоза Проблемы репродукции, Том 25, № 5, 2019. С. 36-41. (год публикации - 2019) https://doi.org/10.17116/repro20192505136

3. Адамян Л.В., Арсланян К.Н., Харченко Э.И., Логинова О.Н. Современные направления в медикаментозном лечении эндометриоза Проблемы репродукции, Том 25, № 3, 2019. С. 63-71. (год публикации - 2019) https://doi.org/10.17116/repro20192506163

4. Адамян Л.В., Осипова А.А., Азнаурова Я.Б., Сонова М.М., Петров И.В., Сунцова М.В., Буздин А.А. Анализ экспрессии генов и активации сигнальных путей в эутопическом и эктопическом эндометрии пациенток с наружным генитальным эндометриозом. Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии, Том 18, с.6-10 (год публикации - 2019) https://doi.org/10.20953/1726-1678-2019-1-6-10

5. Адамян Л.В., Сонова М.М. , Арсланян К.Н., Логинова О.Н., Харченко Э.И. Окислительный стресс и эндометриоз: обзор литературы. Лечащий врач, №12, 2019, стр.20-25 (год публикации - 2019)

6. Адамян Л.В., Сонова М.М., Арсланян К.Н., Логинова О.Н. Особенности хронической тазовой боли у пациенток с наружным генитальным эндометриозом Лечащий врач, №9, стр 83-87 (год публикации - 2019) https://doi.org/10.26295/OS.2019.44.85.018


Аннотация результатов, полученных в 2020 году
За отчетный период завершен статистический анализ сравнительных результатов обследования и лечения больных разными формами эндометриоза, представлены дополнительные сведения, обосновывающие возможность эффективной ранней мало- и неинвазивной диагностики эндометриоза. Расширена клиническая характеристика больных наружным генитальным эндометриозом. Установлено, что к клинико-анамнестическим факторам риска развития наружного генитального эндометриоза относятся наличие преморбидного фона в виде перенесенных воспалительных заболеваний, а также отягощенный семейный анамнез у 25,5% пациенток с эндометриоидными кистами яичников и 37,8% с ретроцервикальным эндометриозом. Пациенток с отягощенным семейным анамнезом по эндометриозу, а также с наличием воспалительных заболеваний органов малого таза в анамнезе следует относить в группу риска по развитию наружного генитального эндометриоза. Это позволит повысить внимание к профилактике, динамическому наблюдению, диспансеризации с целью выявления эндометриоза до клинической манифестации и реализации репродуктивной функции с учетом высокого риска развития заболевания. Наиболее частыми жалобами у пациенток с наружным генитальным эндометриозом были боли внизу живота, бесплодие, болезненные менструации, диспареуния, наиболее выраженные при ретроцервикальном эндометриозе. Изучение ближайших и отдаленных результатов лечения показало высокую эффективность оперативного лечения, что подтверждается большой частотой наступления беременности, в том числе самопроизвольной и в результате применения методов вспомогательных репродуктивных технологий, а также низкой частотой развития рецидивов. Вероятность наступления беременности, как самопроизвольной, так и в результате применения методов вспомогательных репродуктивных технологий, после оперативного вмешательства по поводу эндометриоза выше у женщин, которым была выполнено иссечение ретроцервикального эндометриоза. При хирургическом лечении эндометриоза пациенткам может быть рекомендовано проведение протеомного исследования тканей эктопического эндометрия для выявления белков-маркеров с целью прогнозирования риска рецидивирования, что позволит определить тактику ведения пациенток после операции и рекомендовать сроки реализации репродуктивной функции. Внедрение нового алгоритма диагностики эндометриоза позволит выявить заболевание на ранней стадии, своевременно назначить лечение, и предотвратить возникновение рецидивов. За отчетный период завершено также клиническое обследование больных разными формами аденомиоза. Проведен про- и ретроспективный анализ клинических наблюдений за 109 больными, которые были объединены в 5 групп в зависимости от формы и стадии распространения заболевания. Основная часть пациенток (25,7%) - это больные с диффузной формой аденомиоза IV ст., характеризующейся вовлечением в патологический процесс, помимо матки, париетальной брюшины малого таза и соседних органов. Полученные результаты свидетельствуют о том, что что основными факторами риска развития аденомиоза являются оперативные вмешательства на матке, раздельное лечебно-диагностическое выскабливание полости матки (81,7%), инструментальные вмешательства при самопроизвольных выкидышах, неразвивающихся беременностях и искусственном прерывании беременности (72,5%), а также различные воспалительные заболевания органов малого таза и матки (16,5%), отягощенная наследственность в отношении опухолевых процессов (3,7%). Кроме этого, развитие и прогрессирование аденомиоза провоцируют различные эндокринопатии (22,9%), заболевания пищеварительного тракта (21,1%), что является сигналом о повреждениях на иммунном и межклеточном уровне. Клиническая симптоматика проявляется нарушениями менструальной функции в виде менометроррагии (66,1%), ациклических маточных кровотечений (59,6%), дисменорей (43,1%), а также генеративной функции - бесплодие как первичное, так и вторичное (6,4%). Выраженность клинической симптоматики не всегда коррелирует со стадией аденомиоза. У этой же категории больных с разными формами аденомиоза проведено морфологическое исследование состояния эутопического и эктопического эндометрия, иммуногистохимическое изучение экспрессии моэзина, PAK 4, MMP 2, MMP 9 и CD34. С этой целью исследовали образцы эутопического и эктопического эндометрия у 40 пациенток репродуктивного и пременопаузального возраста в фазу пролиферации и раннюю фазу секреции менструального цикла с разными формами аденомиоза. Результаты гистологического исследования показали, что как при диффузной форме аденомиоза тела матки, так и при аденомиомах, независимо от фазы менструального цикла, у женщин репродуктивного возраста граница эндометрия с миометрием неровная, «зубчатая», за счет множественных очагов врастания стромального и железистого компонентов базального слоя эндометрия в миометрий и пучков субэндометриального слоя миометрия в эндометрий. Результаты иммуногистохимического исследования выявили многократное, в 3–8,5 раза, по сравнению с группой сравнения, повышение экспрессии моэзина, РАК 4, ММР 2 и MMP 9 в эпителии и стромальных клетках не только в эктопических эндометриоидных очагах при аденомиозе и аденомиомах, но и в базальном слое эутопического эндометрия. Достоверной разницы в экспрессии изученных ферментов между эутопическим базальным слоем эндометрия и эктопическими очагами как при аденомиозе, так и при аденомиомах не обнаружено, как и между эктопическими эндометриоидными очагами при аденомиозе и аденомиомах. Однако выявлена тенденция к повышенной экспрессии изученных ферментов в миометрии, окружающем эктопические эндометриоидные очаги при аденомиозе, а также в миоцитах и строме аденомиом. Другой блок работы касался изучения значения микроРНК и их белков-мишеней в качестве патогенетических и диагностических маркеров различных форм наружного генитального эндометриоза. Установлено, что уровень экспрессии мкРНК зависит от фазы менструального цикла. В эутопическом эндометрии больных эндометриозом имеет место повышение экспрессии miR-143-3p, miR-106b-5p и miR-1-3p, что позволяет рассматривать их в качестве потенциальных диагностических маркеров эндометриоза. Выявлена дифференциальная экспрессия пРНК в тканях эндометрия, а также участие генов-мишеней пРНК в сигнальных каскадах, регулирующих процессы клеточного деления, что может свидетельствовать о возможном вкладе пРНК в патогенетические механизмы развития эндометриоза. На основании проведенного анализа обоснована целесообразность и актуальность исследований молекулярных маркеров в тканях эктопического и эутопического эндометрия, позволяющих расширить представления о патогенезе эндометриоза и определить возможные молекулярные мишени для терапевтического воздействия. Установленные отличия в экспрессии ряда мкРНК в эутопическом эндометрии у женщин, страдающих эндометриозом и без данной патологии, в перспективе могут иметь практическое применение, поскольку биопсия слизистой матки является малоинвазивной процедурой, а анализ маркерных РНК может служить дополнительным методом диагностики эндометриоза. Полученные в 2020 году результаты включены в тематический план лекций, практических занятий для учебной программы сертификационного усовершенствования «Акушерство и гинекология (репродуктивная медицина и хирургия с курсом эндоскопии)», который реализуется на кафедре репродуктивной медицины и хирургии ФГБОУ ВО МГМСУ им. А.И. Евдокимова. Руководитель научного коллектива с участием исполнителей проекта организовал и провел три научно-практические конференции, включая два международных конгресса, в которых отдельные секции были посвящены обсуждению проблем эндометриоза, в том числе результатов, полученных в ходе выполнения данного проекта. В отчетном году опубликованы пять статей в журналах «Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии» (Scopus), «Проблемы репродукции» (Scopus, РИНЦ), «Лечащий врач» (РИНЦ), глава «Эндометриоз» в Руководстве для врачей «Гинекология. Фармакотерапия без ошибок» (прилагаются).

 

Публикации

1. Адамян Л.В, Сонова М.М., Арсланян К.Н., Логинова О.Н. Роль цитокинов в клинике наружного генитального эндометриоза и хронической тазовой боли Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии, том 19, №1, с. 5–11, 2020 (год публикации - 2020) https://doi.org/10.20953/1726-1678-2020-1-5-11

2. Л. В. Адамян, К. Н. Арсланян, О. Н. Логинова ,Э. И. Харченко Диета и эндометриоз. Обзор литературы Лечащий врач, №3, с.30-36, 2020 (год публикации - 2020) https://doi.org/10.26295/OS.2020.96.76.005

3. Л. В. Адамян, Л. М. Манукян, В. О. Зайратьянц, К. Н. Арсланян, О. Н. Логинова, Участие ERM-белков в регуляции клеточного цитоскелета и роль белка моэзин в патогенезе аденомиоза Лечащий врач, №12, с.54-58 (год публикации - 2020) https://doi.org/10.26295/OS.2020.хх.хх.ххх

4. Л. В. Адамян, Манукян Л.М., О. Н. Логинова ,К. Н. Арсланян, В.О. Зайратьянц Роль матриксных металлопротеиназ в патогенезе эндометриоза ( обзор литературы) Проблемы репродукции, Том 26, № 2, с.96-103 (год публикации - 2020) https://doi.org/10.17116/repro20202602195

5. Л.В.Адамян, Я.Б.Азнаурова Эндометриоз и рак: сравнительная характеристика и новые перспективы лечения и профилактики Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии, том 19, №3, с. 95–100, 2020. (год публикации - 2020) https://doi.org/10.20953/1726-1678-2020-3-95-100

6. Адамян Л.В. Эндометриоз. Гинекология. Фармакотерапия без ошибок. Руководство для врачей/ под ред. Г.Т.Сухих, В.Н. Серова, В.Н.Прилепиской, И.И.Баранова. - М.: Е-ното, 2020. - 544с. - ( Серия " Фармакотерапия без ошибок")., Глава № 3. С.305-317. (год публикации - 2020)


Возможность практического использования результатов
Внедрение результатов проекта в практику здравоохранения позволит расширить спектр оказания специализированной медицинской помощи женщинам, больным эндометриозом. Использование неинвазивных молекулярных маркеров диагностики и мониторинга течения заболевания увеличит вероятность ранней и эффективной диагностики эндометриоза, прогнозирования вероятности рецидива и результативности лечения. После реализации полученных данных возрастет число больных, которым будет предложено хирургическое лечение с применением минимально инвазивных эндоскопических технологий в объеме не радикального, а органосохраняющего вмешательства. Снижение травматичности хирургического лечения приведет к сокращению пребывания больных в стационаре, полноценной социальной и медицинской реабилитации больных. Выработанные четкий алгоритм и стандарты ведения больных эндометриозом ограничат назначение неадекватных лечебно-диагностических процедур, сократят сроки лечения, продолжительность временной нетрудоспособности, снизят стоимость лечения. Указанные характеристики обеспечат доступность и ценовую приемлемость высокотехнологичных видов медицинской помощи в лечебных учреждениях страны.