КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер 22-26-00254

НазваниеРазработка новой кормовой добавки для крупного рогатого скота на основе микроэлементов в ультрадисперсной форме

РуководительКамирова Айна Маратовна, Кандидат биологических наук

Организация финансирования, регион Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук", Оренбургская обл

Период выполнения при поддержке РНФ 2022 г. - 2023 г. 

Конкурс№64 - Конкурс 2021 года «Проведение фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований малыми отдельными научными группами».

Область знания, основной код классификатора 06 - Сельскохозяйственные науки, 06-204 - Животноводство

Ключевые словакрупный рогатый скот, питание, микроэлементы, ультрадисперсная форма, рубцовое пищеварение, микрофлора, элементный статус, продуктивность

Код ГРНТИ68.03.05


СтатусУспешно завершен


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
Повышение продуктивности сельскохозяйственных животных сопровождается метаболическими перестройками, в значительной степени изменяющими потребность организма в эссенциальных микронутриентах. Дефицит важных микроэлементов: кобальта, марганца характеризуется высокой частотой среди поголовья крупного рогатого скота. Предполагается, что микроэлементные премиксы и препараты могут быть использованы для повышения производительности сельскохозяйственных животных, особенно в условиях субоптимального поступления микроэлементов в организм, однако данные предположения не имеют достаточной доказательной базы и основаны на отдельных наблюдениях на лабораторных животных или птице при применении микроэлементов в классической неорганической форме, в основном в виде сульфатов. В этой связи, целью настоящего исследования является изучение метаболизма крупного рогатого скота на фоне применения микроэлементных смесей в ультрадисперсной форме, с одной стороны, для изучения фундаментальных аспектов обмена микроэлементов, тогда как с другой, для пересмотра существующих норм потребления и создания премиксов для повышения продуктивности и качества мяса. Для достижения поставленных целей будет проведено изучение безопасности и функционала используемых компонентов кормовой добавки и в тестах in vitro, на биолюминесцентных тест систем и в модельных экспериментах с использованием установки "искусственный рубец" (1 год). На основании данных о безопасности и метаболических паттернах, полученных на 1 этапе реализации проекта, будет проведено исследование эффективности применения премиксов на основе микроэлементов в ультрадисперсной форме (Сo, Mn) для метаболической коррекции и повышения мясной продуктивности (2 год). Анализ микроэлементов будет проведен с использованием подходов, основанных на определении общего уровня микроэлементов в тканях. С учетом предполагаемой тесной взаимосвязи обмена микроэлементов и состава мкробиома кишечника, будет изучен таксономический состав микробиома желудочно-кишечного тракта бычков мясных пород. Для оценки интегрального состояния здоровья животных будет проведена оценка биохимических маркеров, а также гематологических показателей периферической крови животных. В целях оценки качества мяса будет проводиться оценка аминокислотного и жирнокислотного состава методами капиллярного электрофореза. На основе полученных данных будет проведен сравнительный анализ, позволяющий выявить наиболее характерные метаболические паттерны, связанные с высокой продуктивностью. Данный подход позволит, с одной стороны, решить фундаментальные научные задачи по изучению закономерностей обмена микроэлементов в организме сельскохозяйственных животных в зависимости от продуктивности, тогда как с другой, позволит выявить мишени для коррекции обмена микроэлементов в условиях повышенной потребности организма высокопродуктивных животных в микронутриентах с последующим пересмотром норм потребления и созданием премиксов для повышения продуктивности.

Ожидаемые результаты
В ходе реализации проекта будет изучен метаболизм крупного рогатого скота сна фоне применения микроэлементных смесей в ультрадисперсной форме (Сo, Mn). Впервые будет дана подробная характеристика обмена эссенциальных микроэлементов. Полученные данные создадут базу для пересмотра существующих норм потребления микронутриентов высокопродуктивными животными, характеризующимися возрастающими потребностями в микронутриентах вследствие более интенсивного метаболизма. Будет впервые установлена взаимосвязь между продуктивностью крупного рогатого скота, элементным статусом и таксономическим разнообразием микробиома желудочно-кишечного тракта, оцениваемого методом метагеномного секвенирования, что позволит выявить потенциальное взаимное влияние обмена микроэлементов и функционального состояния микробиома желудочно-кишечного тракта. Комплексный подход к оценке обмена микроэлементов в организме будет также совмещен с изучением показателей качества мяса на основе определения содержания микроэлементов, а также аминокислотного и жирнокислотного состава. Будут выявлены наиболее характерные метаболические паттерны, связанные с высокой продуктивностью и качеством мяса. Полученные результаты будут основой для разработки прототипа метаболической коррекции обмена микронутриентов в организме животных с целью повышения качества мяса и продуктивности. Таким образом, реализация проекта предполагает получение принципиально новых данных, не имеющих на настоящий момент аналогов. Предлагаемый проект позволит с одной стороны устранить данные пробелы в фундаментальной науке, тогда как с другой, создаст научную базу для решения практических вопросов мясного скотоводства путем пересмотра норм потребления элементов высокопродуктивными животными и создания премиксов на основе микроэлементов в ультрадисперсной форме, определяющих высокий уровень биодоступности. На основании результатов исследования будет подготовлены и опубликовано 3 статьи в журналах, индексируемых в Scopus, в т.ч. Animal nutrition (Q1), Journal of Trace Elements in Medicine and Biology (Q2) или Biological Trace Element Research (Q2), Сельскохозяйственная биология; 6 статей в журналах базы РИНЦ. Практические решения в области животноводства на основе полученных данных будут зарегистрированы в качестве объектов интеллектуальной собственности (не менее 1 патента на изобретения). Наиболее значимые результаты будут представлены на международных конференциях.


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ


Аннотация результатов, полученных в 2022 году
В результате проведенных исследований установлены эффективные концентрации УДЧ Co3O4 и Mn2O7 подавляющие 20, 50 и 80 % люминесценции (ЕС20, ЕС50 и ЕС80, соответственно) при двух температурах (25 и 40 ˚С) в дистиллированной воде и рубцовой жидкости. Показано, что степень токсичности возрастает с увеличением температуры суспензирования в виду распада агрегировавших частиц на более мелкие фракции, но уменьшается при взаимодействии УДЧ с рубцовой жидкостью. Так, эффективные концентрации УДЧ в дистиллированной воде (25 ˚С, 35кГц) составили для УДЧ Co3O4 7,8×10-3; 9,8×10-4; 1,5×10-5 моль/л, для УДЧ Mn2O7 2,5×10-1, 1,6×10-2 и 3,9×10-3 моль/л, соответственно. При более глубоком диспергировании УДЧ сохраняли высокую степень токсичности (ЕС80) до 3,91×10-3 моль/л. В начале эксперимента светимость контрольного образца за счет интенсивного расходования питательного субстрата увеличивается на 22,5 % за 15 минут, после чего постепенно снижается до 59,6 % от исходного значения. В то время как в самом большом разбавлении 0,00024 моль/л светимость бактериального штамма в суспензии Mn2O3 и Co3O4 на первой секунде составляет 61,4 и 67,2 %, соответственно, от аналогичного показателя контрольной пробы, а в случае 0,25 моль/л – всего 10,2 и 0,5%. Значение индекса токсичности Т, при вычислении которого контроль принимается за 100 %, наглядно свидетельствует о снижении ядовитых свойств суспензии с уменьшением в ней доли УДЧ: от 89,76 % в 0,25 молярной концентрации до 38,57 % в 0,00024 моль/л на первой минуте эксперимента и от 95,16 % до 52,85 %, соответственно, в конце третьего часа для окиси марганца, с эквивалентными характеристиками 99,44-32,80% и 99,43-54,72% для окиси кобальта. Исследованы морфо-функциональные изменения в структуре клеток Escherichia coli 25322 при воздействии на них двух концентраций УДЧ: 3,9×10-3 (субтоксичная) и 2,5×10-1 (токсичная). Во втором случае выявлены глубокие деградационные процессы – свыше 50 % обследованных клеток полностью разрушены, 37 % утратили свой объем, вокруг клеточных структур определяется ореол цитоплазматического содержимого (нарушена проницаемость клеточной мембраны), 8 % - с признаками нарушения септирования, деление клеток неравномерное или незавершенное (нитевидные структуры, чрезмерно удлиненные клетки – 5-6 мкм против 1,5-3,5 мкм в контроле), 5% - с точечными деформациями мембраны. Такие изменения вызваны широким спектром механизмов воздействия УДЧ на клетку. В виду своих малых размеров они легко проникают через мембраны, изменяя их потенциал, связываются с ДНК, нарушают митохондриальный цикл. В опыте с субтоксичными концентрациями УДЧ определяются только точечные деформации клеток (40% случаев), в остальном – клетки идентичны показателям контроля. Оценена переваримость сухого вещества корма in vitro и in situ при добавлении УДЧ Co3O4 и Mn2O3. Отмечено, что данные УДЧ в дозировке 0,003906 М способствуют высоким показателям переваримости сухого вещества. Остальные концентрации не оказывали статистически значимого влияния на переваримость кормов. Возможно, нахождение избыточного количества компонентов в составе исследуемых субстратов, которые препятствовали активации ферментных систем бактерий рубца. По результатам исследований in situ установлено, что на переваримость корма оказывает воздействие исследуемый фактор. Повышение переваримости кормов in situ при введении дозировки 0,003906 М (УДЧ Co3O4 и Mn2O3) возможно объясняется тем, что данная доза является наиболее оптимальной, с наилучшим соотношением активных веществ в её составе, которые способствуют лучшему перевариванию рациона. На наш взгляд, более низкая доза вводимого вещества, в частности 0,001953 М на голову в сутки, не в достаточной мере способствует усилению обменных процессов и улучшению физиологических показателей состояния животных, более высокая дозировка 0,007813 М снижает показатели рубцового пищеварения и переваримости компонентов рационов. На основании полученных данных нами были выбраны оптимальная дозировка для дальнейшего исследования на молодняке крупного рогатого скота: УДЧ Co3O4 и Mn2O3 - 0,003906 М.

 

Публикации

1. Иванищева А.П., Сизова Е.А., Камирова А.М., Мусабаева Л.Л. Макро- и микроэлементы в питании животных: многообразие веществ и форм: обзор Животноводство и кормопроизводство, - (год публикации - 2023)

2. Камирова А.М., Сизова Е.А., Шошин Д.Е. Воздействие Mn2O3 и Co3O4 на бактериальную люминесценцию и переваримость сухого вещества (in vitro) Животноводство и кормопроизврдство, Том 6 (1) (год публикации - 2023)

3. Шошин Д.Е., Сизова Е.А., Камирова А.М. Ингибирование бактериальной биолюминесценции ультрадисперсными частицами состава Mn2O3 и Co3O4 в рубцовой жидкости Сельскохозяйственная биология, - (год публикации - 2023)

4. Шошин Д.Е., Сизова Е.А., Камирова А.М. Взаимодействие ультрадисперсных частиц оксида кобальта Co3O4 с экстрактом травы душицы Origanum vulgare Животноводство и кормопроиводство, 2022, том 105 (4) (год публикации - 2022)


Аннотация результатов, полученных в 2023 году
В результате проведенных исследований установлено, что использование УДФ Mn2O3 привело к увеличению количества бактерий семейств Muribaculaceae, Arcobacteraceae и Comamonadaceae на 2,42 %, 16,2 и 15,8 % соответственно. На уровне рода, отмечалось повышение доли бактерий, относящихся к Aliarcobacter, Comamonas и меньшее содержание микроорганизмов таксонов Lentimicrobium, Prevotella, Acinetobacter в микробиоме животных. Применение УДФ Co3O4 способствовало меньшому количеству бактерий таксона Moraxellaceae, и большей доле микроорганизмов семейства Comamonadaceae, что в основном было связано с изменением числа бактерий р. Acinetobacter и р. Comamonas. Расчеты индексов альфа-разнообразия показал большее богатство и изобилие таксонов в микробиоте опытной группы в сравнении с контролем. Исследован элементный состав рубцовой жидкости, где было обнаружено достоверное (Р≤0,05-0,001) снижение концентрации алюминия, галлия, индия, свинца и висмута в пределах 42,8; 88,5; 97,6; 26,8 и 97,8 %, соответственно, при введении УДФ Co3O4. Также наблюдалась тенденция к увеличению доли магния, кальция, железа (Р≤0,05), бария, хрома, и цинка (Р≤0,01), что говорит о положительном смещении биохимических процессов в рубце. В свою очередь добавка УДФ Mn2O3 вела к несколько иным сдвигам. В частности, наблюдается снижение экстракции натрия, магния, калия, стронция, висмута. Напротив, обратная зависимость была характерна для алюминия, галлия, однако их доля также была меньше контрольных значений. Изучение биохимических показателей сыворотки крови в эксперименте показывает наличие колебаний значения показателей в рамках физиологических. Исследования показали, что применения ультрадисперсных форм металлов в составе рациона влияет на жировой обмен. Так при добавлении к рациону УДФ Mn2O3 концентрация триглицеридов и холестерина увеличиваются на 0,2 % и 14,9 % по сравнению с контролем. Эти же показатели так же изменяются при внесении УДФ Co3O4: триглицериды снижаются на 3,2 % (Р≤0,05), а холестерин напротив, увеличивается на 18,2 % относительно контроля. Оценено влияние УДФ Co3O4 и Mn2O3 на переваримость питательных веществ, где было выявлено ряд различий в эффективности использования корма. Так, переваримость сухого вещества была увеличена при введении УДФ Mn2O3 на 30 % (Р≤0,01), УДФ Co3O4 - 22 % (Р≤0,01) относительно контроля. Аналогичное повышение коэффициента переваримости органического вещества составило 30,2 % (Р≤0,05) и 22 % (Р≤0,01). Значения переваримости сырого протеина увеличились при внесении УДФ Co3O4 на 9,2 % (Р≤0,05), а при УДФ Mn2O3 мы наблюдаем достоверное снижение на 8,4 % (Р≤0,05) соответственно. Переваримость сырого жира оказалась незначительно выше при УДФ Mn2O3 по отношению к контролю (1,8 %). Коэффициент переваримости сырой клетчатки повышался в опытных группах (Р≤0,05; Р≤0,01). Аналогичное повышение переваримости отмечалось нами и для безазотистых экстрактивных веществ. Установлено, что при добавлении УДФ Mn2O3 происходит увеличение пальмитиновой, пальмитоленовой и олеиновой кислот на 0,5; 0,4 (Р≤0,05) и 0,7 % (Р≤0,05) по сравнению с контрольной группой, что быть результатом ингибирования ацетил-КоА-карбоксилазы и синтазы жирных кислот после приема УДФ Co3O4 с кормом. Анализ полученных показал, что в обеих группах происходит увеличение доли аминокислот в мякоти тушки. При УДФ Mn2O3 концентрация аргинина, лизина, лейцин+изолейцина, треонина увеличиваются по сравнению с контролем. Концентрация пролина, серина, гистидина изменяется незначительно при добавлении к рациону УДФ Mn2O3. Введение УДФ Co3O4 сопровождается увеличением содержания аргинина, лизина, метеонина, лейцина+изолейцина и треонина по сравнению с контролем. При анализе элементного состава мышечной ткани в группе с УДФ Co3O4 отмечено снижение концентрации алюминия, серебра, свинца, и висмута при параллельном повышении доли марганца, бария и железа. Несколько отличная динамика выявлена в отношении группы с УДФ Mn2O3, где снижено содержание алюминия, никеля и хрома (Р≤0,5) при увеличении количества меди и железа. По результатам исследований предложен и научно обоснован прототип кормовой добавки для крупного рогатого скота мясного направления продуктивности включающий ультрадисперсные частицы оксида марганца, которую скармливают в период откорма.

 

Публикации

1. Камирова А. М., Сизова Е.А., Шошин Д.Е., Иванищева А.П. The combined effect of ultrafine particles of cobalt and manganese oxides and Origanum vulgare herb extract on ruminal digestion in vitro Veterinary World, - (год публикации - 2024)

2. Камирова А.М., Сизова Е.А., Шошин Д.Е., Иванищева А.П. Влияние различных доз кобальта на рубцовое пищеварение крупного рогатого скота «Сибирский вестник сельскохозяйственной науки», 2023;53(10):85-92. (год публикации - 2023) https://doi.org/10.26898/0370-8799-2023-10-10

3. Шошин Д.Е., Сизова Е.А., Камирова А.М., Иванищева А.П. Ультрадисперсные частицы Co3O4 и Mn2O3 как эффекторы рубцового пищеварения in vitro ЖИВОТНОВОДСТВО И КОРМОПРОИЗВОДСТВО, Том 1, №1, 2024 (год публикации - 2024)

4. Шошин Д.Е., Сизова Е.А.,Камироваа А.М. Morphological changes and luminescence of E. coli in contact with Mn2O3 and Co3O4 ultrafine particles as components of a mineral feed additive JOURNAL OF BIOSCIENCES, - (год публикации - 2024)

5. Лутковская Я.В., Сизова Е.А., Камирова А.М. Ультрадисперсные формы микроэлементов в рационе жвачных животных:влияние на продуктивность и здоровье Аграрный научный журнал, - (год публикации - 2024)

6. Камирова Айна Маратовна, Сизова Елена Анатольевна, Иванищева Анастасия Павловна, Шошин Даниил Евгеньевич, Рахматуллин Шамиль Гафиуллович, Юлдашева Ильмира Закиевна. Способ повышения переваримости корма жвачными животными. -, - (год публикации - )


Возможность практического использования результатов
Заявка № 2023123965/10(052735) Способ повышения переваримости корма жвачными животными