КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


Номер 22-16-20008

НазваниеФенотипирование и генотипирование стародавних сортов яровой мягкой пшеницы и основного набора из питомников международной программы КАСИБ, идентификация локусов, ассоциированных с признаками продуктивности растений, устойчивости к засухе, болезням и качества зерна для маркер-ориентированной селекции в Западной Сибири

РуководительШаманин Владимир Петрович, Доктор сельскохозяйственных наук

Организация финансирования, регион федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина", Омская обл

Период выполнения при поддержке РНФ 2022 г. - 2024 г. 

Конкурс№66 - Конкурс 2022 года «Проведение фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований отдельными научными группами» (региональный конкурс).

Область знания, основной код классификатора 06 - Сельскохозяйственные науки, 06-104 - Агробиотехнологии

Ключевые словаПшеница, сорт, источник, ландрасы, фенотипирование, ген, высокопроизводительное генотипирование, ассоциированное картирование, гибриды, устойчивость, засуха, болезни, качество зерна, селекция

Код ГРНТИ68.35.03


 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ


Аннотация
Площадь посева пшеницы в России составляет более 28 млн га, из них около 40-45 % занимает яровая. Однако рост производства зерна в яровосеющих регионах страны сдерживается негативными факторами, связанными с изменчивостью климата, возрастанием инфекционной нагрузки, отсутствием высокоурожайных сортов с комплексной устойчивостью к засухе и болезням. Инфекция, заносимая из сопредельных областей Республики Казахстан оказывает негативное влияние на урожайность яровой пшеницы в Западной Сибири. Расширение генетической основы устойчивости коммерческих сортов яровой пшеницы представляет одну из важнейших задач селекции для повышения стабильности урожая, технологических и пищевых свойств зерна в евразийском регионе России. Стародавние сорта пшеницы (ландрасы) представляют собой ценный генетический ресурс, для повышения устойчивости к негативным абиотическим и биотическим факторам окружающей среды, практически не используемый в селекции, которая в основном ориентирована на высокую урожайность с применением химических средств защиты урожая. Изучение обширной коллекции ландрас пшеницы сотрудниками ВИР и, так называемой, коллекции Watkins из 32 стран мира свидетельствует о селекционной ценности ландрас в качестве исходного материала. В последние годы в Австралии, Великобритании, Франции и других странах (http://www.csiro.au, http://www. innovationfarm.co.uk) заметно активизировалась научно-исследовательская деятельность, связанная с предселекционным изучением пшеницы. Ландрасы пшеницы могут служить источниками новых генов хозяйственно-ценных признаков, для идентификации которых эффективен метод GWAS. Казахстанско-Сибирская сеть по улучшения яровой пшеницы (КАСИБ) была основана под эгидой СИММИТ в 2000 году и включает в себя 20 научных и селекционных учреждений Казахстана и России. За 20 лет существования сети КАСБ проведено 11 двухлетних совместных сортоиспытаний и изучено более 400 сортов яровой мягкой пшеницы. Однако работать с полным набором не представляется возможным. Идея «основного набора» (core set) получила широкое распространение в работе с генетическими ресурсами. Суть данного подхода в отборе ограниченного набора образцов, который максимально отражал бы генетическое разнообразие всего большого набора. Данные генотипирования СIMMYT, результаты сортоиспытания КАСИБ в каждом цикле (урожайность, устойчивость к болезням и другие признаки) послужили основой для создания основного набора КАСИБ (ОН-КАСИБ), который является отражением современного состояния селекции яровой мягкой пшеницы в России и Казахстане. В 2019 года ОН-КАСИБ был высеян потомством колосьев (для чистоты генетических исследований) в Омском ГАУ и получены семена для дальнейших исследований. Использование в проекте современных цифровых методов фенотипирования растений, высокоскоростное генотипирование и ассоциированное маркирование хозяйственно-ценных признаков, внесет существенный вклад в разработку технологии маркер-ориентированной селекции и ускорения процессов создания сортов. Применение технологии KASPтм, которая широко апробирована в современных селекционных программах, также является доступным и надежным инструментом по идентификации маркеров, ассоциированных с генами селекционно-ценных признаков. Научная новизна исследований состоит в выявлении ценных, в том числе утерянных в процессе селекции генов засухоустойчивости, устойчивости к болезням и качества зерна и их источников среди стародавних (ландрас) и современных сортов российской и казахстанской селекции (ОН-КАСИБ) методами высокопроизводительного генотипирования с последующим ассоциированным маркированием и в создании нового гибридного материала с более широкой генетической основой для селекционных программ. Повышение стабильности урожая по годам и качества зерна пшеницы одна из важнейших задач обеспечения продовольственной независимости страны и сохранения приоритета в экспорте российского зерна на мировом рынке.

Ожидаемые результаты
1. Коллекция ландрас и ОН-КАСИБ будет фенотипирована по основным хозяйственно-ценным признакам, морфометрическим параметрам корневой системы, признакам качества зерна и микроэлементов (Zn, Fe и др.) с использованием современных методов точного фенотипирования, включая цифровые и выделены источники вышеуказанных признаков. 2. Получены результаты полногеномного генотипирования ландрас ( 100 шт.) и сортов ОН-КАСИБ (150 шт.) на платформе 135K Affymetrix и ассоциированного маркирования генов, контролирующих хозяйственно-ценные признаки по результатам полевых опытов 2022-2023 гг. 3. Выделены KASP-маркеры на основе результатов ассоциированного маркирования и разработаны рекомендации сопутствующего отбора с участием выявленных KASP-маркеров, которые могут быть рекомендованы для использования во всех селекционных учреждениях России, занимающихся яровой пшеницей. 4. Селекционный материал Омского ГАУ будет генотипирован по выделенным KASP-маркерам, сопряженным с устойчивостью к болезням и абиотическим стрессам, признаками качества зерна, компонентами продуктивности растений и урожайностью. Выделены перспективные маркеры, указывающих на гены, которые оказывают значимый эффект на проявление агрономических признаков. 5. Сформирована коллекция генетических источников селекционно-ценных генов и признаков из ландрас и сортов питомника ОН-КАСИБ для геномных технологий и использования в селекции. 6. Создан новый исходный материал скрещиванием стародавних и современных сортов, а также с ранее выявленными источниками ценных генов, на основе которого с помощью маркер-ориентированной селекции будет ускорен селекционный процесс выведения сортов яровой мягкой пшеницы с признаками адаптивности и качества зерна для евразийских регионов России. 7. Разработана технология ускорения селекционного процесса и повышения эффективности отбора на основе маркер-контролируемого отбора, современных методов и инструментов фенотипирования, включая цифровые.


 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ


Аннотация результатов, полученных в 2022 году
Основные научные результаты за 2022 год по проекту: «Высокопроизводительное генотипирование современных сортов яровой мягкой пшеницы России, Казахстана и ландрас из коллекции ВИР, выявление ценных генов и создание гибридного материала на основе выделенных источников высокой урожайности, качества зерна, устойчивости к негативным абиотическим и биотическим факторам среды» следующие: 1. Выявлены фенотипические и генетические источники для селекции на устойчивость к биотическим и абиотическим стрессам, компонентам продуктивности, урожайности и качества зерна среди 100 стародавних сортов яровой мягкой пшеницы (ландрас), включенных в коллекцию ВИР до 1951 г., а также среди 150 лучших сортов так называемого «основного набора» КАСИБ (ОН-КАСИБ), созданных в селекционных учреждениях России и Казахстана и выделенных по результатам их комплексной оценки участниками программы КАСИБ за период с 2000-2020 гг. 2. В условиях южной лесостепи Западной Сибири основная часть ландрас имели продолжительность периода вегетации на уровне среднераннего стандарта Памяти Азиева (79–80 сут.). 3. Установлено, что ландрасы, среди которых встречаются и образцы полбы (T. dicoccum), из Средней Азии (Кыргызстан, Таджикистан и Узбекистан) по некоторым признакам корневой системы имеют более высокие значения: длина (68,6 и 63,4 см), степень разветвления (190,5 и 212,3 шт.), по числу окончаний (107,6 и 111,3 шт.) и перекрестков (13,9 и 14,6 шт.), что свидетельствует об их значимости как источников для улучшения признаков корневой системы. 4. По комплексу признаков корневой системы среди ландрас выделены источники для селекции на засухоустойчивость: из Ростовской области и Алтайского края - Лютесценс 5 (к-22471), Голуха (к-26446), Русак (11373), к-22687, НОЭ (к-23303); из Казахстана - к-25051 , к-35623, к-34400; Средней Азии - Богаре Бугдай, Красная (к-29619), Сандык (к-39267), Хозяйственный образец №151 (к-25195, к-25225); T. dicoccum - к-1593 (Германия) и к-11750 (Армения). Из питомника ОН-КАСИБ: сорта российской селекции - ЛД 25 (Саратовский НИИ Ю-В), Лютесценс 1003 (Алтайский НЦА); казахстанской селекции - СамГАУ (Каз. НПЦ ЗиР), Фитон С50 ЧС, Фитон 43 (НПЦ «Фитон»). 5. В период атмосферной температуры выше 25°С, корреляция между температурой листьев растений в фазе молочной спелости и полученной урожайностью зерна у сортов стародавней пшеницы не выявлена, а у современных сортов отмечена на уровне среднего отрицательного значения (r = –0,38 при уровне значимости Р05 = 0,17), что свидетельствует о более низкой устойчивости современных сортов к высоким температурам атмосферного воздуха в период молочной спелости. 6. Стародавние сорта имели урожайность в пределах 200–270 г/м2 и существенно уступали сортам современной селекции (370–402 г/м2), которые отличаются большей массой колоса (1,5 г), 1000 зерен, более крупной зерновкой (ширина зерновки 3,2 мм, площадь – 15,7 мм2), более широким флаговым листом (0,8–0,9 см) и его общей площадью (13,6–14,1 см2). Для селекции в питомнике ОН-КАСИБ выделены источники для повышения урожайности зерна пшеницы.. 7. Генотипированием ландрас с использованием 64-х KASP-маркеров идентифицированы гены устойчивости к бурой и стеблевой ржавчине: LrCen, Lr14a, Sr2, Sr9В, Sr11, Sr33; ген устойчивости к септориозу Tsn1, гены засухоустойчивости TaDreb-B1 и 1-feh w3, ген возрастной устойчивости к стеблевой ржавчине Sr2. Выявлены источники указанных генов для селекции на устойчивость к биотическим и абиотическим факторам среды. 8. Выявлена селекционная ценность ландрас для улучшения признаков качества: среднее содержание белка в зерне по группам из разных регионов (18,2–18,6%), клейковины (41,6–43,0%), сырой клейковины в муке (46,6–49,4%) и зольности (1,6–1,7%). Проведена идентификация генов, обусловливающих хлебопекарное качество и выявлены источники аллелей Glu-D1d, Glu-B1al (Bx7 OE), гена Gpc-B1, детерминирующего повышенное содержание белка в зерне, TaGS-D1a, ассоциированного с повышенной массой зерновки. 10. Выполнен компьютерный анализ 6000 цифровых изображений, полученными видео-оцифровкой RGB (Red, Green, Blue – красного, зеленого и синего) сигналов, производимых фотокамерой Nicon D5100, в три фазы вегетации растений: выход в трубку, колошение и цветение под углом наклона камеры на 45о и 90о. По коэффициентам линейных корреляций определена связь между показателями RGB и селекционно-значимыми признаками. Полученные данные свидетельствуют о практической значимости использования анализа цифровых изображений для оценки развития листового аппарата, сопряженного с признаками корневой системы, восприимчивости к листовым патогенам и отдельными компонентами продуктивности растений. 11. Проведено полногеномное генотипирование 150 сортов яровой мягкой пшеницы «основного набора» КАСИБ и коллекции стародавних сортов пшеницы из коллекции ВИР с помощью платформы Affymetrix 135K (Германия, www.traitgenetics.de) для последующего ассоциированного маркирования и сравнительной оценки генетического разнообразия данных коллекций исходного материала.

 

Публикации

1. Morgounov A. , Li , Shepelev S. , Ali M., Flis , Koksel H., Savin T. , Shamanin V. Genetic characterization of spring wheat germplasm for macro-, microelements and trace metals Plants, V. 11, P. 2173 (год публикации - 2022) https://doi.org/10.3390/plants11162173

2. Пoтoцкaя И.В., Шепелев С.С., Ессе С.А., Гладких М.С., Кошкин М.Н., Зуев Е.В., Шaмaнин В.П. Анализ SNP-локусов, ассоциированных с генами качества зерна, у стародавних сортов пшеницы из коллекции ВИР Вестник Омского государственного аграрного университета, № 2 (46). – С. 43–51 (год публикации - 2022) https://doi.org/10.48136/2222-0364_2022_2_43

3. Шепелев С.С., Потоцкая И.В., Чурсин А.С., Кошкин М.Н., Ессе С.А., Безукладов И.В., Вернер А.О., Шаманин В.П. Идентификация SNP-локусов у сортов яровой мягкой пшеницы международной программы КАСИБ Генофонд и селекция растений: материалы 6-й междунар. конф. (Новосибирск, 23–25 ноября 2022 г.)., С. 219-223. (год публикации - 2022) https://doi.org/10.18669/GPB-2022-01

4. Koksel Н., Pototskaya I.V., Shepelev S.S., Chrsin A.S., Kuzmin O.G., Pozherukova V.E., E.V. Zuev, Gladkih M.S., Aydarov A.N., Esse S.A., Koshkin M.N., Shamanin V.P. Genetic diversity of grain quality traits of wheat landraces from the VIR collection 20th ICC Conference «Future Challenges for Cereal Science and Technology», Vienna, Austria (July 5-7, 2022). – P. 124. (год публикации - 2022)


Аннотация результатов, полученных в 2023 году
Основные научные результаты за 2023 год по проекту: «Фенотипирование и генотипирование стародавних сортов яровой мягкой пшеницы и основного набора из питомников международной программы КАСИБ, идентификация локусов, ассоциированных с признаками продуктивности растений, устойчивости к засухе, болезням и качества зерна для маркер-ориентированной селекции в Западной Сибири» следующие: 1. Материалом для исследования служили 100 стародавних сортов из коллекции ВИР, собранных в период с 1908 по 1951 гг. и 150 современных сортов основного набора из питомников КАСИБ, созданных в селекционных учреждениях России и Казахстана за период с 2000–2020 гг. На опытном поле Омского ГАУ сорта высевали сеялкой ССФК-7, площадь делянок 1м², повторность в 4-х кратная. Изучаемые сорта оценили по вегетационному периоду, признакам устойчивости к болезням, параметрам корневой системы, компонентам продуктивности растений и качеству зерна. Выполнен компьютерный анализ 6000 цифровых изображений, полученных видео-оцифровкой RGB (Red, Green, Blue – красного, зеленого и синего) сигналов, производимых фотокамерой Nicon D5100, в три фазы вегетации растений: выход в трубку, колошение и цветение под углом наклона камеры на 45о и 90о. По результатам полногеномного генотипирования изученных сортов на платформе Affymetrix (Германия, www.traitgenetics.de) проведен анализ ассоциаций маркер-признак (MTA) c использованием мультилокусной модели BLINK по 89-ти хозяйственно-ценным признакам. 2. Установлено, что сортообразцы ландрас в среднем имели межфазный периода всходы – колошение на уровне среднераннего стандарта Памяти Азиева (40–41 сут.), современные сорта в целом более позднеспелые у них период всходы – колошение в среднем составил 45 суток. Флаговый лист стародавних сортов имеет меньшие размеры, чем у современных сортов пшеницы. Получены значимые отрицательные корреляции (r = -0,35 – -0,77) между показателями размера листовой пластинки яровой пшеницы и значениями спектра RGB: чем меньше параметры листа, тем темнее и насыщенней цветовая палитра. 3. В условиях засухи поражения коллекции бурой и стеблевой ржавчиной не отмечено, установлена степень поражения сортообразцов мучнистой росой от 6 до 2 баллов, индекс устойчивости – более 0,81, что свидетельствует о сильной восприимчивости сортообразцов к данной инфекции. Среди коллекции ОН-КАСИБ в качестве источников были выделены сорта с индексом устойчивости 0,66. 4. Определены морфометрические параметры корней стародавних и современных сортов пшеницы: ширина корней, суммарная длина корней, площадь корней, средний диаметр, объем корней, число окончаний корней и др. Отмечены высокие отрицательные корреляции между показателями RGB, при оценке под углом 90о, с параметрами корневой системы в фазу выхода в трубку. Среди ландрас выделены источники по комплексу признаков корневой системы: Перерод (к-1934), Белоколоска (к-8884), Красноколоска местная (к-22396), Голоколоска (к-9207), к-22687, Белотурка (к-26464), Гирка (к-25567), Кубанка (к- 25568), Китайская (к-34506) и др. 5. Выделены генотипы с более низкой температурой листовой поверхности в период атмосферной засухи (температура воздуха выше 25 °С), что свидетельствует об их повышенной засухоустойчивости: Экада 113, Эритроспермум 65, Астана 2 и др. 6. Выявлена средняя связь урожайности с вегетационным индексом (NDVI) – r = 0,31–0,33 (уровень значимости Р = 0,17 при Р = 0,05). Среди современных сортов выделены источники быстрого прироста вегетативной массы: Лютесценс 53-94-98-2, Павлодарская 11, Фитон С 36 ЧС, Экада 113 Эритроспермум 65 и др. 7. Средняя урожайность стародавних сортов не превышала 2,1 т/га, у сортов современной селекции она составила 2,52 т/га. Преимущество современных сортов по урожайности обусловлено в основном большей продуктивностью колоса (1,1 г) и массой 1000 зерен (41,9 г). Ландрасы более склонны к полеганию в сравнении с сортами КАСИБ. Получены достоверные отрицательные корреляции между показателями RGB и признаками массы колоса, массы зерна главного колоса, массы зерна растения, массы 1000 зерен, Кхоз. и урожайности при оценке под углом 90о. Выявленные корреляции целесообразно учитывать для повышения эффективности отбора при селекции в засушливых условиях. 8. Выделены сорта стародавней пшеницы источники высокой антиоксидантной способностью (АОА) для производства продуктов функционального питания и в качестве источников высокого показателя АОА (выше средних значений по выборке) в абсолютных единицах (8,49–14,08 мг∙экв. аскорбиновой кислоты / 100 г. продукта) и относительных единицах DPPH (79,00–89,74%). 9. В качестве источников с повышенным содержанием макро- и микроэлементов в зерне для селекции на улучшение питательной ценности зерна пшеницы можно использовать сорта современной селекции (питомник ОН-КАСИБ): Лютесценс 27-90-98-3 (Павлодарский НИИСХ), Лютесценс 844, Лютесценс 665/1 (Алтайский НИИСХ), Лютесценс 23490 (Челябинский НИИСХ), Лютесценс 96-12, Лютесценс 89-06 (Омский ГАУ). 10. По содержанию белка, клейковины и стекловидности зерна стародавняя пшеница имеет широкое генотипическое разнообразие: белок 15,1-23,1%, клейковина 31,7-57,7%; стекловидность 57,9-62,2%. Современные сорта пшеницы имели более высокие показатели массы 1000 зерен – 41,9 г, выхода муки – 54,7%, седиментации – 39,7 мл и индекса глютена – 96,3%. 11. По результатам полногеномного генотипирования установлено: из 24145 выявленных SNP-локусов схожий полиморфизм в генотипах ландрас и современных сортов отмечен по 1714 SNP-локусам; в коллекции ландрас имеются уникальные 294 SNPs (36% в геноме А; 41% в геноме В; 24% в геноме D); в коллекции современных сортов – 273 SNPs (48% в геноме А; 37% в геноме В; 15% в геноме D); разные аллельные варианты по 530 SNPs – в коллекциях ландрас и современных сортов (44% в геноме А; 40% в геноме В; 16% в геноме D). 12. По результатам полевых и лабораторных исследований, в коллекции ландрас из набора 294-х SNPs выявлены 20 SNPs, ассоциированные с хозяйственно-ценными признаками: С использованием панели картирования ассоциаций T3/Wheat (https://wheat.triticeaetoolbox.org/) были постулированы гены-кандидаты, которые присутствуют в генотипе стародавних сортов и были утрачены в процессе селекции. 13. Из набора 273-х SNPs, два SNPs присутствовали исключительно в современных сортах и полностью отсутствовали в ландрасах – GENE-0777_105 (хромосома 2B), ассоциированный с признаками продуктивности и Tdurum_contig55097_601 (хромосома 5А), соответственно с параметрами корневой системы, оба имели положительный эффект на изученные признаки в 2022–2023 гг. 14. Выделены 46 SNPs, присутствующие как в современных сортах, так и в ландрасах; идентифицированы гены, которые имели значимый эффект на экспрессию хозяйственно-ценных признаков, в том числе с плейотропным эффектом. 15. SNP-маркеры, сцепленные эффективными генами целесообразно использовать в маркер-ориентируемой селекции для эффективности отбора при селекции на повышение урожайности, качества зерна и адаптивности пшеницы к стрессовым факторам.

 

Публикации

1. Ессе С.А., Пoтoцкaя И.В., Гладких М.С., Шaмaнин В.П. Характеристика стародавних сортов яровой мягкой пшеницы по элементам продуктивности растений и урожайности в условиях Западной Сибири Вестник Омского ГАУ, № 3 (51). С. 50-59. (год публикации - 2023)

2. Ессе С.А., Потоцкая И.В., Гладких М.С., Шаманин В.П. Сравнительный анализ стародавних и современных сортов яровой мягкой пшеницы Итоги и перспективы развития Сибирского земледелия»: Изд-во Омский ГАУ (2 марта 2023 г.). – Омск, Омск, 2023. С. 57-61. (год публикации - 2023)

3. Пoтoцкaя И.В., Агеева Е.В., Филиппова Е.А., Шрейдер Е.Р., Шaмaнин В.П. Оценка качества зерна современных сортов яровой мягкой пшеницы питом-ника КАСИБ-22 на Урале и Западной Сибири Аграрный научный журнал, № 11. – С. 107-113. (год публикации - 2023) https://doi.org/10.28983/asj.y2023i11pp107-113

4. Шаманин В.П., Потоцкая И.В., Ессе С.А., Гладких М.С., Шепелев С.С., Зуев Е.В., Виниченко Н.А., Коксель Х., Моргунов A.И. Стародавние сорта пшеницы – источники высокого качества и питательных свойств зерна Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции, T. 184, № 4 (год публикации - 2023)

5. Шаманин В.П., Чурсин А.С., Шепелев С.С., Кузьмин О.Г., Потоцкая И.В. Стратегия селекции пшеницы в Омской ГАУ в условиях глобальных вызовов и обеспечения импортонезависимости Импортонезависимость и продовольственная безопасность: глобальные вызовы и стратегические тренды развития АПК в условиях трансформации международных экономических отношений: Изд-во Ом-ский ГАУ (14 июня 2023 г.). – Омск., Омск, 2023 – С. 87-91. (год публикации - 2023)

6. Шепелев С.С., Потоцкая И.В., Чурсин А.С., Моргунов А.И., Шаманин В.П. Маркер-ориентированная селекция яровой мягкой пшеницы на повышение урожайности, качества зерна, устойчивости к болезням и засухе в условиях Западной Сибири Зерновое хозяйство России, Т. 15. № 2. С. 18-25. (год публикации - 2023) https://doi.org/10.31367/2079-8725-2023-85-2-18-25