Аннотация результатов, полученных в 2020 году
Была разработана технология получения оптимальных образцов диспергируемых в ротовой полости образцов носителей на основе интерполимерных сочетаний (мет)акрилатных полимеров. Для этого были получены образцы интерполиэлектролитных комплексов (ИПЭК) на основе линейного полимера Eudragit EPO – сополимера катионного характера на основе диметиламиноэтилметакрилата и нейтральных эфиров метакриловой кислоты и сетчатого полимера - сополимера карбомера - высокомолекулярного сополимера акриловой кислоты и длинноцепочечного алкилметакрилата, поперечно-сшитого аллиловыми эфирами полиспиртов двух марок Noveon® AA-1 кислотной формы полимера акриловой кислоты с дивинилгликолем и Carbopol® 10 Ultrez, представляющего собой моно- и сополимер акриловой кислоты, редкосшитый полиалкилированным полиэфиром. Кроме того, были получены образцы полимер-лекарственного комплекса на основе линейного полимера Eudragit EPO и лекарственного вещества ибупрофена. Доказано образование комплексов – новых соединений методами ИК-спектроскопии, ДСК анализа. На ИК-спектрах образцов интерполиэлектролитных комплексов (ИПЭК) появляется полоса поглощения при 1560 см-1, отсутствующая у индивидуальных полимеров, которая обусловлена образованием ионных связей между карбоксилатными группами Carbopol® и протонированными диметиламиногруппами ЕРО. Появление новых полос поглощения, ранее отсутствующих у исходных полимеров, доказывает образование между ними поликомплексов. На ДСК термограммах ИПЭК появляется определенная температура стеклования (127°-138°С), отличающаяся от образцов индивидуальных полимеров (68° - 131°С), что доказывает образование комплексов как химически индивидуальных соединений. На ДСК-термограмме не наблюдается стеклования свободного Eudragit® ЕРО в интервале температур от 40 до 60°С, подтверждающих отсутствие свободного сополимера катионного характера на основе диметил- аминоэтилметакрилата и нейтральных эфиров метакриловой кислоты (Eudragit® EPO). Исследования мукоадгезивной способности ИПЭК показали, что образцы обладают мукоадгезивной способностью. Адгезивная способность обусловлена отрицательным зарядом карбоксильных групп редкосшитого полимера на поверхности частиц ИПЭК, обеспечивающих взаимодействие с олигосахаридными цепями муцина. Анализ размера и поверхностного заряда частиц показал, что полученные образцы ИПЭК обладают наноразмерностью, заряд частиц зависит от присутствия свободных ионизированных карбоксильных групп Carbopol® (Noveon®), либо положительно-заряженных диметиламиногрупп EPO на поверхности. Получены оптимальные образцы ДРПЛФ на основе: 1) ИПЭК Noveon® AA-1- Eudragit EPO (1:2), метформина, мальтодекстрина, спана-80 2) ИПЭК Carbopol® 10 Ultrez - Eudragit EPO (1:1), метронидазола, мальтодекстрина, спана-80 3) ИПЭК Noveon® AA-1- Eudragit EPO (1:2), клобетазола (при различных соотношениях 50:50, 70:30, 90:10), мальтодекстрина, спана-80. После получения лиофилизированных таблеток была проведена оценка распадаемости. Согласно проведенным исследованиям полученные образцы лиофилизированных быстродиспергируемых таблеток соответствуют требованиям, предъявлямым к данной лекарственной форме, а именно, распадаются в течении одной минуты. Был исследован размер и заряд частиц после диспергирования таблеток-лиофилизатов. Размер частиц снижается при введении ЛВ в состав таблетки, так со среднего размера частиц без ЛВ 921,2±34 нм при введении метформина размер становится почти в 2 раза меньше - 464,7±50 нм, а в случае с метронидазолом 272±35 нм. В случае лиофилизатов с клобетазолом в соотношении 5:5=323±69нм; 7:3=350±87нм; 9:1= 356±70 нм. Оценка высвобождения из ДРПЛФ с клобетазолом проводилась в среде искусственная слюна, на приборе ячейка Франца, при температуре 37±0,5ºС. Согласно полученным результатам, в случае образца в соотношении ЛВ:ИПЭК 5:5 наблюдается резкий рост показателей высвобождения с максимумом на 90 мин, с последующим снижением концентрации. При соотношении ЛВ:ИПЭК = 7:3 практически постоянный уровень высвобождения на протяжении всего эксперимента. А при соотношении 9:1 обеспечивается пролонгированное высвобождение, показатели высвобождения постепенно нарастают. Сравнительная оценка кинетики высвобождения метформина и метронидазола из полученных ДРПЛФ проводилась с использованием трех аппаратов для растворения: лопастной мешалки (метод 2), проточной ячейки (метод 3 по ГФ РФ, метод 4 USP), на ячейке Франца. Все методы были максимально приближены к условиям, симулирующим пребывание таблетки в ротовой полости. В случае метода 2 таблетка помещалась на дно стакана вместимостью 1 л, таблетка накрывалась диском с сетчатой поверхностью, что препятствовало всплытию и равномерному высвобождению ЛВ. В проточной ячейке скорость потока жидкости составила 2 мл/мин, что также максимально приближено к условиям в ротовой полости. В случае ячейки Франца диализная мембрана симулировала пребывание лекарственной формы на поверхности щеки, и постепенную диффузию ЛВ через нее. Из всех трех методов максимальные показатели высвобождения наблюдаются в методе «проточная ячейка» и ячейка Франца, последний метод наиболее подходит для оценки высвобождения из данных лекарственных форм. В случае метформина максимум высвобождения достигается через 90 мин эксперимента, при том на ячейке Франца видно максимум высвобождения, с последующим снижением показателей. При оценке высвобождения метронидазола также максимумы высвобождения ЛВ наблюдаются спустя 90 мин эксперимента в случае метода 2 и «проточной ячейки». При исследовании на ячейке Франца благодаря диффузии через диализную мембрану, концентрация ЛВ нарастает постепенно и составляет максимум через 270 мин. Таким образом, высвобождение из лиофилизированных таблеток начинается немедленно при помещении их в жидкую среду, а благодаря наличию в составе таблеток ИПЭК, даже при диспергировании таблетки на мелкие частицы, которые обладают мукоадгезивными свойствами к слизистой оболочке, становится возможным высвобождение ЛВ в течении длительного времени. Был произведен обсчет результатов кинетики высвобождения ЛВ из лиофилизированных таблеток. Согласно проведенному анализу высвобождение происходит нелинейно, по аллометрической функции во всех проведенных методах оценки высвобождения. Таким образом, получены оптимальные образцы ДРПЛФ на основе: 1) ИПЭК Noveon® AA-1- Eudragit EPO (1:2), метформина, мальтодекстрина, спана-80 2) ИПЭК Carbopol® 10 Ultrez - Eudragit EPO (1:1), метронидазола, мальтодекстрина, спана-80 3) ИПЭК Noveon® AA-1- Eudragit EPO (1:2), клобетазола (при различных соотношениях 50:50, 70:30, 90:10), мальтодекстрина, спана-80. Полученные образцы ДРПЛФ обладают распадаемостью в соответствии с предъявляемыми требованиями к диспергируемым лекарственным формам, а также характеризуются немедленным высвобождением ЛВ, а также благодаря наличию ИПЭК в составе становится возможным пролонгированное высвобождение из диспергированных частиц в течении длительного времени.

Аннотация результатов, полученных в 2021 году
Были проведены фармакологические исследования оптимальных образцов ИПЭК в составе ДРПЛФ, содержащих метронидазол и ибупрофен: - острая токсичность синтезированных ИПЭК была исследована на лабораторных животных (мыши). - безвредность применения полученных поликомплексов и их композиций с лекарственными веществами (в составе ДРПЛФ) была исследована на экспериментальных животных (мыши). - проведены фармакокинетические исследования ДРПЛФ на кроликах методом ВЭЖХ по определению концентрации ЛВ в сыворотке крови животных на разных сроках наблюдения с лекарственными веществами (метронидазол, ибупрофен). Острая токсичность и безвредность. В исследовании было использовано 48 белых мышей—самцов массой 20-25 г, возрастом 4 мес. Водные растворы исследуемых соединений вводились однократно внутрижелудочно при помощи специального зонда. Токсичность всех соединений (№1,2,3) была изучена в дозах 1000 мг/кг и 2000мг/кг, каждая из которых вводилась в желудок 6 мышам. Контрольной группе вводилась дистиллированная вода аналогичным способом. Кроме того, была изучена токсичность соединения №1 в дозе 5000мг/кг. Общая продолжительность наблюдения за животными после введения веществ составляла 3 дня. В первый день животные находились под наблюдением в течение 6 часов. На протяжении всего периода наблюдений внешний вид, поведение животных и динамика прибавки массы тела у опытной группы не отличались от аналогичных показателей мышей контрольной группы. Снижения потребления корма, наличия каких—либо признаков интоксикации и гибели мышей в обеих группах не отмечалось. Таким образом, анализ результатов изучения острой токсичности соединений (№1,2,3) при однократном внутрижелудочном введении в дозах 1000мг/кг и 2000 мг/кг, а также соединения №1 в дозе 5000 мг/кг не выявил интоксикации и гибели животных. То есть, лиофилизированные таблетки, содержащие ИПЭК Carbopol 10/Eudragit EPO являются «относительно безвредными», а ПЛК Eudragit® E PO - ибупрофен в соотношении 1-1, 1-2 - «практически нетоксичными». Фармакокинетические исследования. Для фармакокинетических исследований были отобраны 12 кроликов-самцов породы Советская Шиншилла со средним весом 3,00 кг после ночного 12-часового голодания. Каждому кролику было введено по 1 таблетке, предварительно полученных методом лиофильной сушки (содержащих ИПЭК Carbopol 10/Eudragit EPO и метронидазол; либо ПЛК Eudragit® E PO - ибупрофен). Через определенные интервалы времени: 30мин; 1 час; 1,5 часа; 2 часа; 3 часа, 4 часа и 5 часов с момента введения отбирали пробы крови из ушной вены кроликов по 0,5-0,7 мл. После получения реэкстракта пробы вводили через дозатор в хроматограф. Измерения проводились на хроматографе LC-20 Prominence (Shimadzu, Япония) со встроенным УФ/Вид-спектрофотометрическим детектором при длине волны 221 нм для проб с ибупрофеном, при длине волны 319 нм для проб с метронидазолом. Концентрацию лекарственных веществ рассчитывали по методу абсолютной калибровки. Основные фармакокинетические показатели рассчитывались в программе по прикладной фармакокинетике Thermo Kinetica® (Version 5.0, Build 5.00.11; Thermo Fisher Scientific, США). Согласно полученным результатам фармакокинетических исследований образец 2 (содержащий полимер-лекарственный комплекс (ПЛК) Eudragit® EPO - ибупрофен) показывают максимальную концентрацию через 1 час эксперимента (0.9578 мкг/мл) по сравнению с субстанцией ибупрофена (0.2689 мкг/мл). Относительная биодоступность ПЛК Eudragit® E PO - ибупрофен составила Frel= 86,06%. Образец 1 (на основе ИПЭК Carbopol 10/Eudragit EPO и метронидазола) показывает максимальную концентрацию через 30 минут после введения диспергируемых таблеток - Сmax = 4,659 мкг/мл, по сравнению с введенной субстанцией метронидазола, ИПЭК с метронидазолом показывают большее AUC0-5ч, мкг×ч/мл = 8,760, MRT, ч = 7,188, чем субстанция метронидазола Сmax = 2,137; AUC0-5ч, мкг×ч/мл = 5,79, MRT, ч = 6,714. Относительная биодоступность составила Frel =107,6%. Таким образом, образцы таблеток с немедленным высвобождением лекарственных веществ показывают быстрое высвобождение лекарственных веществ через 30 мин (для ИПЭК с метронидазолом), через 1 час - (для ПЛК Eudragit® E PO - ибупрофен), что является главным критерием для лекарственных форм с немедленным высвобождением. То есть оба образца таблеток на основе ПЛК и на основе ИПЭК являются перспективными для немедленного высвобождения.