КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

 

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

Номер 20-14-00312

НазваниеИзучение механизмов возникновения болезни Альцгеймера методом сканирующей ион-проводящей микроскопии

РуководительГорелкин Петр Владимирович, Кандидат физико-математических наук

Организация финансирования, регион Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский технологический университет "МИСИС", г Москва

Период выполнения при поддержке РНФ 2020 г. - 2022 г. 

Конкурс№45 - Конкурс 2020 года «Проведение фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований отдельными научными группами».

Область знания, основной код классификатора 04 - Биология и науки о жизни, 04-205 - Клеточная биология, цитология, гистология

Ключевые словаНанокапилляр, биосенсор, сенсор, наноэлектрод, электрохимия, метод локальной фиксации потенциала, микроэлектрод, клетка, болезнь Альцгеймера

Код ГРНТИ34.17.23

СтатусУспешно завершен

 

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ

Аннотация
Болезнь Альцгеймера (БА) является наиболее распространенной деменцией и нейродегенеративным заболеванием центральной нервной системы и серьезно угрожает здоровью людей. Но до сих пор не существует эффективных способов диагностики и лечения БА. Патологическими признаками БА являются сенильные бляшки, нейрофибриллярные сплетения и атрофия головного мозга. Возраст является самым высоким фактором риска развития БА, риск развития заболевания достигает 50% для лиц старше 85 лет [B. Duthey, Background paper 6.11: Alzheimer disease and other dementias, Priority Medicines for Europe and the World. "A public Health Approach to Innovation", 2004, pp. 1–74]. Помимо глобального уменьшения объема мозга, одним из отличительных признаков БА является наличие амилоидных бляшек в мозге. Эти бляшки, также называемые сенильными бляшками, обнаруживаются во внеклеточном пространстве мозга при БА и особенно присутствуют в области гиппокампа. Они в основном состоят из пептида, названного Amyloid-β (Aβ), который агрегируется и образует в основном фибриллы, богатые β-листом.В начале 1990-х была предложена гипотеза для объяснения образования сенильных бляшек – гипотеза амилоидного каскада и стала доминирующей моделью для патогенеза БА хотя по-прежнему спорной. Гипотеза предполагала, что аномальное внеклеточное повышение уровней Aβ в мозге может привести к агрегации Aβ в структуры, богатые β-листом [F. Ding, J.M. Borreguero, S.V. Buldyrey, H.E. Stanley, N.V. Dokholyan, Mechanism for the α-helix to β-hairpin transition, Protein.: Struct. Funct. Bioinforma. 53 (2) (2003) 220–228]. Агрегация начинается с образования видов олигомеров, которые реорганизуются в протофибриллы и фибриллы, обнаруживаемые в амилоидных бляшках. Предполагается, что олигомеры, накопленные в мозге пациентов с БА, являются наиболее токсичными для клеток, так как они могут, в частности, пронизывать клеточные мембраны, инициируя серию событий, приводящих к дисфункции и гибели клеток [C.G. Glabe, Common mechanisms of amyloid oligomer pathogenesis in degenerative disease, Neurobiol. Aging 27 (4) (2006) 570–575]. Согласно этой гипотезе, другие ранние события, такие как внутриклеточное образование нейрофибриллярных клубков и нарушение синаптических функций, будут результатом этого раннего и ключевого события. Эксперименты по исследованию взаимодействия олигомеров Aβ с клетками часто проводятся при концентрациях олигомеров и мономеров, значительно превышающих концентрации, которые содержатся в физиологических условиях. Ранее исследования по внутриклеточному АФК в нейрональных клетках проводилось флуоресцентными методами, что не позволяет однозначно определить концентрацию и кинетику определения АФК внутри клеток, а для изучения влияния олигомеров бета-амилоида на механические свойства нейронов [Viji Babu PK and Radmacher M (2019) Mechanics of Brain Tissues Studied by Atomic Force Microscopy: A Perspective. Front. Neurosci. 13:600] использовали методы атомно-силовой микроскопии, которые не позволяют проводить картирование с высоким разрешением (менее 100 нм) и малой силой воздействия механических свойств живых нейронов. В этом проекте мы будем использовать нанокапилляр для локальной доставки олигомеров Aβ в астроциты, для контроля местоположения и количества олигомеров, наносимых на отдельную клетку, чтобы получить более детальное представление о молекулярной основе вызванного олигомерами притока кальция и о том, как это зависит от количества олигомеров, с которыми сталкивается клетка. Наш метод основан на сканирующей ионно-проводящей микроскопии (СИПМ) [Shevchuk, A. I. et al. Simultaneous measurement of Ca2+ and cellular dynamics: combined scanning ion conductance and optical microscopy to study contracting cardiac myocytes. Biophysical Journal 81, 1759–1764 (2001)], где изменение тока пипетки обеспечивает обратную связь в реальном времени, что позволяет нанопипетке поддерживать контролируемое расстояние над клеткой [Miragoli, M. et al. Scanning ion conductance microscopy: a convergent high-resolution technology for multi-parametric analysis of living cardiovascular cells. J R Soc Interface. 8(60), 913–925 (2011)] и может легко комбинироваться с флуоресцентной визуализацией. Мы будем использовать нанокапилляры для управляемой доставки небольших молекул, белков или антител в определенные места на поверхности [Takahashi, Y. et al. Multifunctional nanoprobes for nanoscale chemical imaging and localized chemical delivery at surfaces and interfaces. Angew Chem Int Ed Engl. 50(41), 9638–9642 (2011)]. Ранее мы измерили и смоделировали доставку реагентов с помощью нанокапилляра в зависимости от размера капилляра, расстояния от поверхности и приложенного напряжения и давления [Babakinejad, B. et al. Local delivery of molecules from a nanopipette for quantitative receptor mapping on live cells.Anal Chem. 85(19), 9333–9342 (2013)]. Эта модель будет использоваться для оценки количества олигомеров Aβ, доставленных с помощью нанокапилляра. Поэтому использование СИПМ позволит нам иметь постоянную и определенную дозу олигомеров на клеточной поверхности. Это позволит нам проводить высококоличественное измерение влияния низких концентраций олигомеров на приток кальция в нервные клетки.

Ожидаемые результаты
Цель проекта – изучить, как воздействие различных олигомеров бета-амилоидов влияет на функциональные свойства единичных клеток такие как: концентрация внутриклеточных метаболитов, уровень pH, топография и локальные механические свойства, а так же изучить влияние различных химических соединений, являющихся перспективными для создания лекарственных средств для лечения болезни Альцгеймера, на функциональные свойства единичных клеток, подвергшихся воздействию олигомеров бета-амилоида. Изучение механизмов возникновения болезни Альцгеймера является актуальной задачей как для фундаментальных, так и прикладных исследований в биомедицине. Разработка современных лекарственных препаратов для лечения болезни Альцгеймера, требует создания актуальных in vitro и in vivo моделей для точного определения механизма действия препарата и диагностики его эффективности. Для достижения поставленной цели в ходе выполнения проекта необходимо решить несколько основных задач. В ходе первого этапа (2020 г.) будут разработаны биологические in vitro клеточные модели на основе гиппокампальных нейронов крысы, астроцитов и клеток нейробластомы. Будут изготовлены и откалиброваны платиновые электрохимические наноразмерные сенсоров для определения активных форм кислорода (АФК) внутри единичных клеток гиппокампальных нейронов крысы, астроцитов и клеток нейробластомы до и после действия олигомеров бета-амилоидов с различным количеством аминокислот с помощью платиновых электрохимических наноразмерных сенсоров. Будет проведено тестирование на образование АФК в гиппокампальных нейронах крысы, астроцитах и клетках нейробластомы в результате действия олигомеров бета-амилоидов с различным количеством аминокислот флуоресцентными методам. Будут разработаны двуканальные капиллярные сенсоры, включающие электрохимический сенсор на АФК (один канал) и канал для локального дозирования вещества. Будет изучено образование АФК при локальной подаче олигомеров бета-амилоида на единичных клетках гиппокампальных нейронов крысы, астроцитов и клетках нейробластомы, а так же топография и механические свойства клеток гиппокампальных нейронов крысы, астроцитов и клеток нейробластомы до и после действия олигомеров бета-амилоидов с различным количеством аминокислот с помощью сканирующей ион-проводящей микроскопии. Кроме того, будет разработан ряд уникальных методов анализа и проведены исследования, результаты которых лягут в основу научных публикаций в журналах. В ходе первого года выполнения проекта предполагается подготовить 3 публикации, индексируемых Web of Science и Scopus. Разработанным уникальным техническим решениям будет предоставлена соответствующая правовая защита. В ходе второго этапа (2021 г.) будет изучено влияние олигомеров бета-амилоида на локальное значение pH на единичных клетках гиппокампальных нейронов крысы, астроцитов и клетках нейробластомы.Будут проведены исследования корреляции топографии и локального значения pH, разработан наноразмерный сенсор на основе двухканального капилляра для одновременного определения pH и АФК.Будет изучено влияние локального дозирования олигомеров бета-амилоида на клеточную мембрану гиппокампальных нейронов крысы и астроцитов путем локального измерения входа кальция в клетки, содержащие флуоресцентный краситель Fluor 4. Результаты второго этапа будут опубликованы в 3 публикациях в журналах, индексируемых Web of Science или Scopus. В ходе третьего этапа (2022 г.) будет разработана in vitro клеточная модель болезни Альцгеймера. Будет разработана методика измерения АФК на in vitro клеточных моделях болезни Альцгеймера с помощью платиновых электрохимических наноразмерных сенсоров. Будут получены методики измерения pH и механических свойств на in vitro клеточных моделях болезни Альцгеймера с помощью метода СИПМ и локального pH сенсора. Будет проведена апробация разработанных методик на известных лекарственных препаратах для лечения болезни Альцгеймера.Будут протестированы химические соединения, перспективные для создания лекарственных препаратов для лечения болезни Альцгеймера разработанными методиками in vitro анализа. Результаты третьего этапа будут опубликованы в 3 публикациях в журналах, индексируемых Web of Science или Scopus. Успешное решение задач настоящего проекта и выполнение поставленной в нем цели будет иметь большой народнохозяйственный эффект – появятся методы воспроизведения и характеризации олигомеров Aβ, и будут получены результаты исследования взаимодействия этих олигомеров с клетками, что позволит развить принципиально новые методики лечения болезни Альцгеймеры. Результаты настоящего исследования могут быть успешно применены в прикладной медицине, биологических исследованиях, биоинженерии и нанотехнологиях. Потребителями результатов настоящего проекта станет ряд ведущих исследовательских центров не только в России, но и во всем мире. Готовый продукт интересен для крупных фармацевтических и медицинских корпораций, ведущих собственные медико-биологические и биоинженерные разработки. В связи с уникальностью научно-исследовательских работ, сложностью инженерно-конструкторских решений в готовом изделии, результатам настоящего проекта будет дана надежная правовая защита, которая позволит гарантировать приоритет российских исследователей в столь актуальной области. Приоритет российской науки над общемировой позволит в дальнейшем осуществлять промышленное производство, в том числе на экспорт, именно силами российских производителей, что однозначно повлечет за собой развитие точного приборостроения и связанных с ним отраслей в масштабах РФ. Кроме того, появление отечественной технологии, лежащей на стыке нанотехнологий и живых систем, приведет к развитию исследований и росту общего технологического уровня именно на территории РФ, даст толчок к появлению целого ряда импортозамещающей продукции российского производства, т.е. произойдет сокращение технологического разрыва, в том числе и в смежных областях.

 

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ

Аннотация результатов, полученных в 2020 году
В ходе выполнения работ второго этапа проекта был подготовлен и опубликован обзор литературных источников (Красновская О.О., 2020 г.) Были разработаны методики изготовления образцов гиппокампальных нейронов, выделенных из крысы, образцов астроцитов, выделеных из крысы и образцов нейробластомы человека SH-SY5Y. Были изготовлены и откалиброваны платиновые электрохимические наноразмерные сенсоры для определения активных форм кислорода (АФК). Был выполнен анализ генерации АФК на образцах гиппокампальных нейронов, астроцитов и клеток человеческой нейробластомы человека SH-SY5Y с помощью флуоресцентных наборов DCFDA / H2DCFDA. По результатам исследования генерации АФК в единичных клетках под действием олигомеров бета-амилоида с помощью изготовленных сенсоров и изучении топографии и механических свойств клеток гиппокампальных нейронов крысы, астроцитов и клеток нейробластомы человека SH-SY5Y до и после действия олигомеров бета-амилоидов с различным количеством аминокислот с помощью сканирующей ион-проводящей микроскопии была подготовлена публикация. Таким образом в результате выполнения работ первого года выполнения проекта планируется опубликовать три публикации в изданиях индексируемых в базах данных «Сеть науки» (Web of Science Core Collection) и/или «Скопус» (Scopus).

 

Публикации

1. Гук Д.А., Наумов А.В., Красновская О.О., Тафеенко В.А., Моисеева А.А., Пергушов В.И., Мельников М.Я., Зык Н.В, Мажуга А.Г., Белоглазкина Е.К. Three types of copper derivatives formed by CuCl2·2H2O interaction with (Z)-3-aryl-2-(methylthio)-5-(pyridine-2-ylmethylene)-3,5-dihydro-4Himidazol-4-ones Dalton Transactions, 2020,49, 14528-14535 (год публикации - 2020) https://doi.org/10.1039/d0dt02817g

2. Колмогоров В.С., Ерофеев А.С., Вудкок Э., Ефремов Ю.М., Яковлев А.П., Савин Н.А., Алова А.В., Лаврушкина С.В., Киреев И.И., Преловская А.О., Свидерская Е.В., Горелкин П.В., Корчев Ю.Е. Mapping mechanical properties of living cells at nanoscale using intrinsic nanopipette-sample force interaction Nanoscale, - (год публикации - 2021)

3. Красновская О.О., Спектор Д.В., Злобин А., Павлов К., Горелкин П.В., Ерофеев А.С., Белоглазкина Е.К., Мажуга А.Г. Metals in Imaging of Alzheimer’s Disease International Journal o f Molecular Sciences, 2020, 21, 9190 (год публикации - 2020) https://doi.org/10.3390/ijms21239190

Аннотация результатов, полученных в 2021 году
В рамках выполнения 2-го этапа проекта были выполнены следующие работы и достигнуты научные результаты: Было изучено влияние олигомеров бета-амилоида на локальное значение pH на единичных клетках гиппокампальных нейронов крысы, астроцитов и клетках нейробластомы. Было показано, что внутриклеточный pH, измеренный на клетках под действием олигомеров Ab, изменялся и был близок к pH в среде, что связано с образованием агрегатов на поверхности мембраны клетки с дальнейшим разрушением. Объяснение заключается в порообразующей активности Ab, которые образуют катион-селективные каналы в липидных мембранах. Таким образом, pH может увеличиваться и становиться близким к pH среды, в которой были инкубированы клетки. Была исследована корреляция топографии и локального значения pH на единичных клетках гиппокампальных нейронов крысы, астроцитов и клеток нейробластомы. Полученные результаты демонстрируют гладкую поверхность мембраны с незначительным количеством микровиллей. Показано, что в случае нейробластомы наблюдаются неоднородные участи с низким pH. Было впервые получено pH картирование на поверхности клеток нейробластомы. Был разработан наноразмерный сенсор на основе двухканального капилляра для одновременного определения pH и АФК. Таким образом была подготовлена и охарактеризована серия образцов разного физического размера для дальнейшей апробации метода коррелятивного исследования pH и АФК на единичных клетках. Были проведены исследования pH и АФК на единичных клетках гиппокампальных нейронов крысы, астроцитов и клетках нейробластомы. Было изучено влияние локального дозирования олигомеров бета-амилоида на клеточную мембрану гиппокампальных нейронов крысы и астроцитов путем локального измерения входа кальция в клетки, содержащие флуоресцентный краситель Fluor 4. было продемонстрировано, что локальное дозирование олигомеров бета-амилоида на клеточную мембрану гиппокампальных нейронов увеличивает общую концентрацию [Ca2+] внутри. Максимум концентрации наблюдался через 60 с после окончания введения Fluo-4, затем происходит уменьшение и через 300 с устанавливается равновесие. Данное наблюдение, скорее всего, связано с тем, что Ab образуют катион-селективные каналы в искусственных плоских липидных мембранах, и образуют проницаемый для кальция канал в мембранах липидных везикул. Существенные данные предполагают, что эти каналы могут опосредовать приток кальция в клетки в ответ на Ab. Были проведены исследования влияния локального дозирования олигомеров бета-амилоида на уровень pH на единичных клетках гиппокампальных нейронов крысы, астроцитов и клетках нейробластомы. Было обнаружено, что после локального дозирования олигомеров бета-амилоида на поверхность нейронов pH увеличивался по сравнению с контрольными клетками, что коррелировало с концентрацией ионов кальция. Однако стоит отметить, что после локального дозирования бета-амилоида на поверхность астроцитов pH также изменялся по сравнению с контрольными клетками, что также коррелировало с концентрацией ионов кальция. Таким образом, впервые было продемонстрировано локальное дозирование Ab амилоида на поверхность единичной клетки с одновременным измерением pH. Показано, что после локального дозирования на поверхность гиппокампальных нейронов значения pH изменялись, в то же время при локальном дозировании амилоида на астроциты такого эффекта не наблюдалось.

 

Публикации

1. Ванеев А.Н., Тимошенко Р.В., Колмогоров В.С., Лопатухина Е.В., Чмелюк Н., Ямансаров Э.Ю., Петров Р., Мажуга А.Г., Корчев Ю.Е., Новак П., Клячко Н.Л., Ерофеев А.С., Горелкин П.В. Electrochemical Method for Real-Time ROS Measurements in Single Cells Biophysical Journal, 120(3):365a (год публикации - 2021) https://doi.org/10.1016/j.bpj.2020.11.2250

2. Колмогоров В.С., Ванеев А.Н., Ефремов Ю.М., Савин Н.А., Яковлев А.П., Алова А.В., Лаврушкина С., Ерофеев А.С., Горелкин П.В., Клячко Н.Л., Киреев И.И., Мажуга А.Г., Новак П., Корчев Ю.Е. Studying the Local Young's Modulus of PC-3 Cells Via Scanning Ion-Conductance Microscopy BIOPHYSICAL JOURNAL, Том 120 Выпуск 3 Страница 162A-162A Приложение 1 Аннотация к встрече 782-Pos (год публикации - 2021) https://doi.org/10.1016/j.bpj.2020.11.1158

Аннотация результатов, полученных в 2022 году
Были разработаны клеточные модели на основе нейробластомы человека (SH-SY5Y) и гиппокампальных нейронов крысы. Данные биологические объекты являются распространенными моделями для оценки нейротоксичности различных соединений. Было показано, что значительный цитотоксический эффект и нарушение клеточного метаболизма, сходное с патогенными нарушениями при БА, наиболее выражены при обработке клеточных линий бета-амилоидным пептидом в концентрации 10 мкМ в течение 24 часов. Были измерены уровни АФК в разработанных in vitro клеточных моделях болезни Альцгеймера с помощью платиновых электрохимических наноразмерных сенсоров. Использование in vitro модели болезни Альцгеймера, включающих в себя первичные культуры и бета амилоид pS8, является более предпочтительным вариантом ввиду схожего действия амилоида на окислительно-восстановительный баланс единичной клетки, что является неоспоримым преимуществом при проведении сравнительных экспериментов, включающих в себя оценку эффективности препаратов, направленных на лечение и терапию БА. Были измерены уровни АФК в разработанных клеточных моделях под действием известных лекарственных препаратов для лечения болезни Альцгеймера. В первую очередь было изучено влияние СОД на уровень АФК в клетках SH-SY5Y под воздействием pS8. На основании полученных данных можно сказать об отсутствии прооксидантного эффекта СОД на единичные клетки. Уровень АФК в контрольных клетках составил 7,8 ± 1,1 мкМ в то время, как под действием СОД 8,4 ± 2,1 мкМ. Уровень АФК под воздействием pS8 + СОД составил 38,8 ± 8,5 мкМ, то есть уровень АФК по сравнению с контролем увеличился в ~4,9 раз, что сопоставимо со среднем повышением АФК под действием pS8 без СОД (на основании ранее представленных данных по воздействию pS8 на SH-SY5Y по прошествии 4 часов). После этого, были проведены аналогичные измерения на первичной культуре гиппокампальных нейронов. Уровень АФК под воздействием pS8 повысился в 2,8 раз по сравнению с контролем, что сопоставимо с ранее полученными данными. При воздействии СОД + pS8 уровень АФК снизился в 1,5 раза по сравнению с чистым pS8, что свидетельствует об антиоксидантной активности СОД. Таким образом, антиоксидантную активность СОД целесообразно проверять на первичных клеточных культурах. Предположительно, отсутствие антиоксидантной активности СОД на клеточную культуру нейробластомы связано с чрезмерно значимым влиянием pS8 на клетки, вызывающим чрезмерный окислительный стресс, активирующий апоптотические процессы Была разработана методика измерения мембранного потенциала на in vitro клеточной модели болезни Альцгеймера с помощью метода СИПМ. Подобраны оптимальные геометрические размеры субмикронных капилляров для успешного формирования гигаОмного контакта между клеткой и капилляром. Оптимальный размер субмикронных капилляров составил 250–500 нм. Кроме того, экспериментально определена величина подаваемого гидростатического давления необходимая для формирования гигаОмного контакта, которая составила 30 кПа. Далее, на in vitro модели измерены мембранные потенциалы в режиме Whole-cell для контрольных клеток, величина которых составила от -40 до -50 м, что сопоставима со значениями, представленными в литературных данных. Успешно разработана методика измерения мембранного потенциала методом СИПМ с совмещенной конфокальной визуализацией флуоресцентно меченых Aβ 42 для обнаружения клеток с формированными агрегатами амилоидов на поверхности мембраны клетки. Измерения мембранного потенциала клеток со сформированными агрегатами показали сниженный мембранный потенциал клеток (от -20 до -30 мВ), что опосредовано нарушениями метаболизма клеток SH-SY5Y, а также с входом внеклеточных ионов Ca2+. Была разработана методика измерения механических свойств на in vitro клеточных моделях болезни Альцгеймера с помощью метода СИПМ. В ходе работы получены калибровочные силовые кривые для измерения локальных механических свойств клеток с использованием нанокапилляров с радиусом острия 50 нм в зависимости от величины падения ионного тока для возможности индентации клетки на разную глубину. Далее, разработанная методика успешно применена для измерения локальных механических свойств клеток в области периферии и центральной части клетки контрольных клеток и после действия Aβ42. По результатам работы обнаружено значительное повышение модуля Юнга как в области периферии, так и в центральной области клеток, что опосредовано повышением внутриклеточного уровня АФК и повышением механического напряжения цитоскелета. Была апробирована разработанная методика на известных лекарственных препаратах для лечения болезни Альцгеймера. Выполнено измерение механических свойств контрольных клеток, клеток после инкубации с супероксиддисмутазой (СОД), после инкубации с Aβ ps8 и после инкубации с Aβ ps8 и с после последующей инкубации с СОД. По результатам работы обнаружено, что воздействие СОД клетки снижают модуль Юнга, что связано с тем, что опухолевые клетки находятся в состоянии повышенного оксидативного стресса и снижение АФК способствует снижению механического напряжения цитоскелета. Воздействие бета-амилоида привело к увеличению модуля Юнга как и в предыдущих экспериментах. В случае ингибирования СОД действия бета-амилоида обнаружилось снижение модуля Юнга до уровня контрольных клеток, что подтверждает успешное снижение АФК и механического напряжения цитоскелета в клетках SH-SY5Y. Были протестированы ряд биологически активных соединений с использованием разработанных методик, которые эффективны при лечении совместно протекающих БА и опухолевых заболеваний. Все синтезированные ацетиленовые производные, которые в дальнейшем могут быть использованы в качестве соединений перспективных для лечения нейродегенеративных заболеваний, были исследованы на цитотоксичность по отношению к клеточным линиям эмбриональных почек человека (HEK 293), гепатоцеллюлярной карциномы (HepG2, Huh7) и рака предстательной железы (PC3). Как упоминалось ранее, желчные кислоты и их производные склонны к накоплению в печени, поэтому HepG2 и Huh7 были выбраны в качестве основных клеточных линий, а HEK 293 и PC3 — в качестве контрольных. При тестировании разработанных препаратов на генерацию АФК с помощью платиновых электрохимических наноразмерных сенсоров было показано, что препараты на основе метронидазола и цисплатина также активно генерируют АФК в сравнении с цисплатином, что свидетельствует о том, что препарат проявляет противоопухолевые свойства.

 

Публикации

1. Спектор Д.В., Ерофеев А.С., Горелкин П.В., Ванеев А.Н., Акасов Р.А., Ульяновский Н.В., Никитина В.Н., Семкина А.С., Власова К.Ю., Солдатов М.А., Тригуб А.Л., Скворцов Д.А., Финько А.В., Зык Н.В., Сахаров Д.А., Мажуга А.Г., Белоглазкина Е.К., Красновская Electrochemical Detection of a Novel Pt(IV) Prodrug with the Metronidazole Axial Ligand in the Hypoxic Area Inorganic Chemistry, 61, 37, 14705–14717 (год публикации - 2022) https://doi.org/10.1021/acs.inorgchem.2c02062

Возможность практического использования результатов
не указано