КАРТОЧКА ПРОЕКТА ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ И ПОИСКОВЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПОДДЕРЖАННОГО РОССИЙСКИМ НАУЧНЫМ ФОНДОМ

Информация подготовлена на основании данных из Информационно-аналитической системы РНФ, содержательная часть представлена в авторской редакции. Все права принадлежат авторам, использование или перепечатка материалов допустима только с предварительного согласия авторов.

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

Номер 16-15-10053

НазваниеИзучение роли витамина D в развитии аффективных расстройств у женщин в климактерический период, поиск путей фармакокорекции

РуководительФедотова Юлия Олеговна, Доктор биологических наук

Организация финансирования, регион федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физиологии им. И.П. Павлова Российской академии наук, г Санкт-Петербург

Период выполнения при поддержке РНФ

2019 г. - 2020 г.

Конкурс Конкурс на продление сроков выполнения проектов, поддержанных грантами Российского научного фонда по приоритетному направлению деятельности Российского научного фонда «Проведение фундаментальных научных исследований и поисковых научных исследований отдельными научными группами».

Область знания, основной код классификатора 05 - Фундаментальные исследования для медицины, 05-501 - Фармацевтическая химия, фармакология (в том числе клиническая фармакология)

Ключевые словавитамин D, аффективные расстройства, депрессия, тревожность, климактерический период, менопауза, эстрогены, фармакотерапия, менопаузальная гормонотерапия

Код ГРНТИ76.31.00

СтатусУспешно завершен

ИНФОРМАЦИЯ ИЗ ЗАЯВКИ

Аннотация
Перименопаузальные расстройства и их фармакотерапия являются одной из актуальных проблем медико-биологической жизни женщин, привлекающей к себе внимание врачей различных специальностей. Прежде всего, это касается диагностики, профилактики и коррекции психоэмоциональных и нейровегетативных расстройств, связанных с климактерическим периодом. Патологические проявления климактерического синдрома влияют на профессиональную деятельность женщин, их социальную активность, межличностные отношения, способствуя формированию у женщин дополнительного психоэмоционального напряжения, что существенно отражается на качестве их жизни. Несмотря на изученность патогенеза и клинических проявлений аффективных расстройств в перименопаузальный период, до настоящего времени, остается много неясных вопросов. Отсутствие четкой картины влияния различных факторов на возникновение аффективных психопатологий депрессивного спектра затрудняет выбор адекватных путей их профилактики и коррекции у женщин перименопаузального возраста. Подбор адекватной терапии эмоционально-аффективных нарушений в перименопаузальный период нередко представляет трудную задачу для врача, поскольку требует учета многих аспектов: анамнестических данных, выраженности и стадии климактерия, особенностей аффективных нарушений. Первым специалистом, к кому обращается женщина с психоэмоциональными нарушениями, оказывается либо терапевт, либо гинеколог или гинеколог-эндокринолог. Так как женщина (а часто, и- специалист, к которому она обращается) склонны связывать, все имеющиеся в анамнезе аффективные расстройства с периодом климакса, то очень часто лечение данных расстройств начинается с применения гормональных средств. Это обусловлено тем, что гинекологи часто объясняют все, имеющиеся в анамнезе психоэмоциональные симптомы только гормональными колебаниями, происходящими в климаксе. Особенно это важно в случае изначально неправильно поставленного диагноза гинекологом, когда все поведенческие нарушения у женщин связываются только исключительно с измененным гормональным фоном в перименопаузальный период, без учета уже ранее возникшего патологического функционирования структур головного мозга (гиппокамп и лимбическая система), непосредственно участвующих в механизмах возникновения аффективных расстройств. К сожалению, пациентки в периоде перименопаузы попадают к психиатру с прежними жалобами после длительного малоэффективного применения гормональных препаратов. Таким образом, на современном этапе при лечении тревожно-депрессивных расстройств в перименопаузальный период перед врачом стоит важная задача индивидуализации терапии, которая возможна только при совместной работе гинеколога и психиатра. В связи с увеличением в перименопаузальном периоде частоты раннего начала проявлений аффективных расстройств, возникает необходимость дальнейшего поиска новых эффективных и максимально безопасных методов профилактики и коррекции аффективных психопатологий. В последнее десятилетие пристальное внимание врачей различных специальностей сосредоточено на исследованиях, посвященных участию витамина Д, в патогенезе психо-эмоциональных расстройств у женщин в перименопаузальный и менопаузальный периоды. При этом, ряд экспериментальных и клинических исследований убедительно свидетельствует о том, что дефицит витамина Д3 может выступать одним из существенных факторов в возникновении различных патологических нарушений со стороны центральной нервной и репродуктивной систем у перименопаузальных женщин. Учитывая вышеизложенное о роли витамина Д в организме, возникает следующий вопрос: может ли дефицит витамина Д в организме усугублять течение аффективных расстройств у перименопаузальных женщин, т.е. может ли низкий уровень витамина Д являться тем дополнительным фактором, который провоцирует развитие клинически выраженных аффективных расстройств депрессивного спектра у перименопаузальных женщин? При этом, можно предполагать, что наличие дефицита витамина Д в организме перименопаузальных женщин с клиническим диагнозом аффективное расстройство депрессивного спектра может изменять скорость и эффективность применяемой психотропной фармакотерапии, вследствие наличия у них такого дополнительного отягчающего фактора. С одной стороны, можно предположить, что нормализация уровня витамина Д в организме (своеобразный пермиссивный «витамин Д3-прайминг») за счет дополнительного назначения витамина Д3 в комбинации с психотропными препаратами (селективные ингибиторы обратного захвата серотонина, СИОЗС), как в условиях дополнительного применения менопаузальной гормонотерапии (МГТ) по жизненно важным гинекологическим показаниям, так и в ее отсутствие, позволит сбалансировать функциональное состояние нейроэндокринной системы в организме перименопаузальных женщин с клиническим психиатрическим диагнозом аффективное расстройство. Можно предполагать, что дополнительный «витамин Д3-прайминг» в терапии аффективных расстройств в перименопаузальный период, когда наблюдается раскоординированность в оптимальном функционировании как среди отдельных звеньев эндокринной и центральной нервной систем, так и в целой нейрогормональной оси, контролирующих состояние гипофизарно-овариальной системы, создаст благоприятные условия для быстрого и максимально эффективного купирования психиатрических манифестаций в перименопаузальный период у женщин. С другой стороны можно также полагать, что витамин Д3 за счет своих нейромодулирующих свойств в отношении серотонинергической нейромедиаторной системы и нейрогормональных свойств в отношении овариальной системы, может и выступать тем передаточным мостиком в сигнальных путях (либо переключателем) в нейротропных эффектах как эстрогенов, так и психотропных препаратов на центральную нервную и гипофизарно-овариальную системы, поскольку в механизмах действия как эстрогенов , так и СИОЗС, так и имеются общие молекулярные мишени, а именно моноамины, нейротрофины и NF-kB сигналинг. В связи с этим, научная основа проекта определяется сформулированной нами оригинальной гипотезой о том, что низкий уровень витамина Д у женщин в период перименопаузы может являться тем дополнительным провоцирующим фактором, который способствует клинических аффективных психопатологий. Отсутствие оптимальной коррекции уровня витамина Д в организме перименопаузальных женщин, как раз и может усугублять тяжесть и характер течения аффективных расстройств депрессивного спектра, а также замедлять и ухудшать терапевтические эффекты от проводимой стандартной психофармакотерапии. Таким образом, данный проект направлен на разработку новых стратегий терапии и тактики лечения аффективных расстройств в перименопаузальный период у женщин с использованием витамина Д3, что позволит не применять «стандартные» методы лечения для какой-то «стандартной» женщины, а походить индивидуально и персофиницированно, учитывая все обстоятельства клинического случая, а также психиатрического и гинекологического анамнезов. Подобный новый персофиницированный подход в лечении аффективных расстройств у женщин в перименопаузальный период будет способствовать увеличению продолжительности их жизни и социальной активности, повышению качества жизни, психоэмоционального принятия своего нового жизненного этапа, а также позволить прожить данный возрастной этап осознанно с использованием соответствующей фармакотерапевтической и медицинской помощи. Это также позволит осознанно подходить к вопросам «здорового» старения и ощущения себя активной, реализованной и социально востребованной женщиной в любом возрасте, независимо от генетически запрограммированного перименопаузального периода, что очень важно в современном и динамично развивающемся мире.

Ожидаемые результаты
Предлагаемый проект посвящен сравнительной оценке терапевтической эффективности применения витамина Д3 в разных дозах в качестве дополнительного средства при проведении психотропной терапии с использованием селективных ингибиторов обратного захвата серотонина (СИОЗС) как в эксперименте у самок крыс разного возраста с моделью менопаузы в условиях индуцированного экспериментального аффективного расстройства, так и в клинике у перименопаузальных женщин разного возраста с установленным клиническим психиатрическим диагнозом аффективное расстройство депрессивного спектра. При этом, особый акцент в проекте будет сделан на изучении молекулярно-биохимических механизмов реализации эффектов витамина Д3, а также на оценке его роли в регуляции активности гипофизарно-овариальной системы и способности модулировать ее функциональную активность. Ожидаемые результаты при выполнении данного проекта будут заключаться в следующем: 1. Впервые будет установлено, может ли комбинированное назначение витамина Д3 с антидепрессантами из группы СИОЗС усилить и ускорить терапевтический отклик на проводимую терапию в экспериментальных условиях у самок крыс разного возраста с моделью менопаузы и с индуцированным аффективным расстройством и в клинических условиях у перименопаузальных женщин с клиническим диагнозом аффективное расстройство депрессивного спектра; 2. Впервые будет определено, может ли дополнительное назначение витамина Д3 снизить дозы антидепрессантов из группы СИОЗС при проведении психотропной фармакотерапии в экспериментальных условиях у самок крыс разного возраста с моделью менопаузы и с индуцированным аффективным расстройством и в клинических условиях у перименопаузальных женщин с клиническим диагнозом аффективное расстройство депрессивного спектра; 3. Впервые будет обнаружено, может ли дополнительное назначение витамина Д3 в комбинации с антидепрессантами из группы СИОЗС улучшить нейроэндокринный статус у тех перименопаузальных женщин, которым в силу их психиатрического анамнеза и/или сопутствующих гинекологических заболеваний, невозможно назначение препаратов МГТ; 4. Впервые будет изучено, может ли дополнительное назначение витамина Д3 в комбинации с антидепрессантами из группы СИОЗС нивелировать нежелательные эффекты от приема препаратов МГТ (которые могут противодействовать или не в полной мере реализовывать терапевтический потенциал психотропной терапии с СИОЗС) у тех перименопаузальных женщин, которым в силу их гинекологического анамнеза жизненно необходимо применение препаратов МГТ; 5. Впервые будет установлено сохраняется ли вектор направленности поведенческих эффектов (позитивный или негативный) витамина Д3 в тех же дозах при его комбинированном использовании совместно с СИОЗС у перименопаузальных женщин с диагносцированным клиническим диагнозом аффективное расстройство, который отмечался у перименопаузальных женщин без клинического психиатрического диагноза аффективное расстройство. 6. Впервые будет проведена оценка молекулярно-биохимических механизмов реализации эффектов витамина Д3 в экспериментальных условиях у самок крыс разного возраста с моделью менопаузы и с индуцированным аффективным расстройством и в клинических условиях у перименопаузальных женщин с клиническим диагнозом аффективное расстройство депрессивного спектра. Кроме того, в результате выполнения нашего исследования впервые будут получены данные о роли витамина Д3 в патогенезе аффективных расстройств депрессивного спектра у перименопаузальных женщин разного возраста, а также установлены молекулярно-биохимические механизмы эффектов витамина Д3 на функциональное состояние нейроэндокринной системы у перименопаузальных женщин разного возраста, нарушение адекватного функционирования которой и приводит к развитию аффективных психопатологий. На основании полученных результатов впервые будет проведена оценка возможности комбинированного использования витамина Д3 с селективными СИОЗС для патогенетически обоснованной коррекции и профилактики аффективных расстройств депрессивного спектра у женщин разного возраста в перименопаузальный период и проведена оценка эффективности лечебных схем, направленных на устранение нарушений в нейроэндокринной системе у перименопаузальных женщин разного возраста с клиническим диагнозом аффективное расстройство депрессивного спектра, как в эксперименте, так и в клинике. Данный проект представляет собой первое систематическое экспериментально-клиническое исследование по установлению характера фармакологических взаимодействий между СИОЗС и витамином Д3, выявлению их синергических комбинаций, оценке их эффективности и переносимости в экспериментальных и клинических условиях. Ожидаемые результаты исследования позволят обосновать перспективность разработки новых фармакотерапевтических тактик лечения аффективных расстройств у женщин в перименопаузальный период на основе комбинаций СИОЗС с витамином Д3. Ожидаемые экспериментальные и клинические данные, полученные в ходе выполнения запланированных исследований в 2019-2020 гг., могут стать научными предпосылками для направленного химического синтеза новых аналогов витамина Д3, или модуляторов рецепторов к витамину Д3, а также для разработки и создания фармацевтическими компаниями нового класса комбинированных фармакологических препаратов менопаузальной гормонотерапии (МГТ), содержащих в своем составе помимо женских половых гормонов, и витамин Д3 в определенной дозе в зависимости от стадии и выраженности как перименопаузальных, так и аффективных расстройств в анамнезе конкретной пациентки. Таким образом, выполнение данного проекта будет иметь огромное научное значение для психонейроэндокринологии, психиатрии, гинекологии и гериатрии, а также будет иметь высокую экономическую и социально-общественную значимость в целом. При этом, уровень планируемых исследований не уступает мировому уровню в данной области, а за счет возможности их проведения в эксперименте и клинике одновременно - превосходит этот уровень.

ОТЧЁТНЫЕ МАТЕРИАЛЫ

Аннотация результатов, полученных в 2019 году
Согласно заявке на 2019 г., была выполнена сравнительная оценка уровня ангедонии, тревожности и депрессивности, а также изменений поведенческого статуса у взрослых овариоэктомированных (ОЭ) самок крыс (2,5-3 месяца) с экспериментальной моделью менопаузы на разных сроках ее развития (через 1, 3 или 6 месяцев) на фоне введения витамина D3 в разных дозах (1,0, 2,5, 5,0 мг/кг, подкожно) одного или в сочетании с низкой дозой 17β-эстрадиола (17β-E2, 0,5 µг/кг, подкожно) в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса в течение 28 дней. Кроме того, был проведен сравнительный фармакологический анализ степени эффективности комбинированного введения разных селективных ингибиторов обратного захвата серотонина (СИОЗС) (флуоксетин, эсциталопрам и пароксетин в дозе 10,0 мг/кг, внутрибрюшинно) в сочетании с витамином D3 или в сочетании с витамином D3 и низкой дозой 17β-E2 у взрослых самок крыс с экспериментальной моделью менопаузы на разных сроках ее развития (через 1, 3 или 6 месяцев) в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса. Параллельно, у всех экспериментальных групп животных была проведена оценка уровня половых тропных и периферических гормонов, кортикостерона, а также концентрации витамина D3 в сыворотке крови; оценка уровня моноаминов и их метаболитах в гиппокампе; уровней нейротрофических факторов (BDNF, NT-3 и NT-4) и уровня провоспалительного фактора (NF-kB р50/p65) в гиппокампе; уровней экспрессии BDNF, NT-3, NT-4, рецепторов к витамину D3 (VDR), NF-kB р50/p65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 в гиппокампе. Антиангедоническое действие витамина D3 или его сочетанное введение с СИОЗС определяли в тесте предпочтения сахарозы (до начала создания модели хронического непредсказуемого умеренного стресса и после); антидепрессивные эффекты – в тесте Порсолта; анксиолитическое действие – в тестах приподнятый «крестообразный» лабиринт и «черно-белая» камера; способность к адаптации в новых условиях – в тесте на гипофагию; поведенческие реакции (двигательная и исследовательская активности, груминговый компонент и реакция новизны) – в тесте «открытое поле». Методом стандартного иммуноферментного анализа определяли значения концентраций ФСГ, ЛГ, ДГЭА, кортикостерона, прогестерона, эстрадиола и 25-ОН-витамина D3 в сыворотке крови. С использованием иммуноферментного метода ELISA оценивали количество BDNF, NT-3, NT-4 и NF-kB р50/65 и с помощью метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) проводили определение уровней моноаминов и их метаболитов (НА, ДА, СА, 3,4-МГФГ, ГВК, ДОФА, 5-ГИУК) в гиппокампе. С помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (Real-time PCR) и Вестерн блоттинга (Western blotting) определяли экспрессию BDNF, NT-3, NT-4, VDR, NF-kB р50/p65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 в гиппокампе. Результаты экспериментов показали, что через 1 месяц у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса, только высокая доза (5,0 мг/кг, подкожно) витамина D3 проявляла антиангедонический, антидепрессивный и анксиолитический эффекты, а также повышала способность к адаптации животных в новых условиях, двигательную и исследовательскую активность. При сочетанном введение витамина D3 в дозе 5,0 мг/кг и 17β-E2 отмечалось синергическое антиангедоническое, антидепрессивное и анксиолитическое действие этих препаратов у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса. Средняя доза витамина D3 (2,5 мг/кг, подкожно) не оказывала какого-либо позитивного эффекта на поведенческие нарушения, обусловленные хроническим непредсказуемым умеренным стрессом, у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса. Необходимо подчеркнуть, что низкая доза витамина D3 (1,0 мг/кг, подкожно), напротив, повышала уровень ангедонии и тревожно-депрессивноподобного поведения у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса. При сочетанном введении витамина D3 в низкой дозе и 17β-E2 происходило снижение антиангедонического, антидепрессивного и анксиолитического действия гормонального препарата у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса. Положительное воздействие высокой дозы витамина D3 на тревожно-депрессивный статус у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса сопровождалось восстановлением уровня ФСГ, ЛГ, ДГЭА, прогестерона, эстрадиола, снижением уровня кортикостерона и повышением уровня витамина D3 в сыворотке крови; нормализацией обмена моноаминов, повышением уровней BDNF и NT-3/NT-4, а также снижением концентрации NF-kB/р65, при одновременном восстановлении экспрессии BDNF, NT-3, NT-4, VDR, NF-kB р50/p65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 в гиппокампе. На основании полученных данных об эффектах разных доз витамина D3 у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса для второго этапа исследований (введение витамина D3 с СИОЗС или введение витамина D3 с СИОЗС и 17β-E2) в качестве терапевтически эффективной дозы нами была выбрана (5,0 мг/кг, подкожно) витамина D3. На фоне введения различных СИОЗС в сочетании с витамином D3 было установлено, что введение эсциталопрама (10,0 мг/кг, внутрибрюшинно) в комбинации с витамином D3 в высокой дозе оказывало более выраженное антиангедоническое, анксиолитическое и антидепрессивное действие, а также более эффективно корректировало молекулярно-биохимические параметры (уровень половых гормонов и кортикостерона и витамина D3 в сыворотке крови, уровень моноаминов и их метаболитов, концентрацию нейротрофических факторов (BDNF, NT-3 и NT-4) и уровня провоспалительного фактора (NF-kB р50/p65) в гиппокампе, степень экспрессии BDNF, NT-3, NT-4, VDR, NF-kB р50/p65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 в гиппокампе) у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса по сравнению с таковыми показателями у ОЭ самок, получавших только эсциталопрам. Причем, сочетанное использование эсциталопрама с витамином D3 (5,0 мг/кг, подкожно) и 17β-E2 приводило к кумулятивному действию фармакологических препаратов. Комбинированное введение пароксетина (10,0 мг/кг, внутрибрюшинно) и витамина D3 оказывало более выраженное антиангедоническое, анксиолитическое и антидепрессивное действие, а также более эффективно улучшало молекулярно-биохимические показатели у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса по сравнению с таковыми показателями у ОЭ самок, получавших только пароксетин. Однако, в отличие от эсциталопрама, какого-либо потенцирующего эффекта при введении пароксетина в сочетании с витамином D3 и 17β-E2 у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса нами не было выявлено. При введении флуоксетина (10,0 мг/кг, внутрибрюшинно) в комбинации как с одним витамином D3, так в сочетании с витамином D3 и 17β-E2 нами не было обнаружено какого-либо усиления антидепрессивного/анксиолитического эффектов флуоксетина у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса, что указывает на низкую терапевтическую эффективность комбинации флуоксетина и витамина D3. Через 3 или 6 месяцев были получены сходные результаты, которые не отличались от таковых через 1 месяц. Таким образом, результаты настоящего исследования свидетельствуют о том, что что наиболее эффективная доза витамина D3 для коррекции тревожно-депрессивного статуса у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса среди исследуемых нами доз является высокая доза. Наибольшим терапевтическим потенциалом обладает комбинация эсциталопрама и витамина D3 в высокой дозе и в средней степени – комбинация пароксетина с витамином D3 у взрослых ОЭ самок с экспериментальной моделью климакса в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса. Использование флуоксетина в сочетании с витамином D3 неэффективно для коррекции поведенческих нарушений у ОЭ самок в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса. Кроме того, согласно заявке на 2019 г. мы провели пилотное клиническое исследование, посвященное анализу степени выраженности аффективных манифестаций у молодых пациенток (35-45 лет) с клинически подтвержденным психиатрическим диагнозом «аффективное расстройство депрессивного спектра» по МКБ-10, а также с диагносцированным климактерическим синдромом разной степени выраженности в стадии перименопаузы. Пациентки с разными психиатрическими диагнозами и климактерическим синдромом, получавшие стандартную психотропную терапию с препаратами из группы СИОЗС (эсциталопрам, пароксетин, сертралин, флувоксамин в зависимости от диагноза) в сочетании только с высокими дозами витамина D3 (40000-80000 МЕ в зависимости от уровня витамина D3 в крови) или с добавлением препаратов менопаузальной гормонотерапии (МГТ), преимущественно клайра. Для детальной оценки выраженности депрессивного расстройства применялась шкала Гамильтона (Hamilton Rating Scale for Depression, HDRS21), состоящая из 21 пункта, и шкала Монтгомери-Асберга (Montgomery-Asberg Depression Rating Scale, MADRS), и шкала тревожности Шихана (ShARS Scale). Методом иммуноферментного анализа с использованием тест-наборов in vitro (Хема-Медика, DRG, Вектор-Бест) определяли значения концентраций ФСГ, ЛГ, ДГЭА, прогестерона, эстрадиола, 25-ОН-витамина D3 в крови. Кроме того, с помощью метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) проводили определение уровней моноаминов и их метаболитов (НА, ДА, СА, ДОФА, 5-ГИУК) в суточной моче и крови у всех экспериментальных групп женщин в возрасте 35-45 лет. С использованием иммуноферментного метода ELISA с использованием тест-наборов оценивали количество BDNF, NT-3, NT-4 и NF-kB р50/65 в крови. С помощью метода Real-time PCR и Western blotting определяли экспрессию BDNF, NT-3, NT-4, VDR, NF-kB р50/р65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 в крови. Через 6 месяцев экспериментальной терапии, снижение аффективной симптоматики у пациенток, получавших СИОЗС в сочетании с витамином D3, составила 76-79%, в то время как в группе пациенток, получавших СИОЗС в сочетании с витамином D3 плюс МГТ она достигла 86-89% от исходных значений (p<0,05). Причем, у пациенток, получавших СИОЗС в сочетании с витамином D3 плюс МГТ, значения показателей тестирования тревожно-депрессивного статуса были практически идентичны таковым значениям контрольной группы (здоровые волонтеры). Редукция уровня тревожности и депрессии у пациенток, получавших СИОЗС в сочетании с витамином D3, или СИОЗС в комбинации с витамином D3 плюс МГТ, сопровождалась восстановлением уровня половых гормонов, нормализацией концентраций кортизола и витамина D3, повышением уровней нейротрофинов в крови и снижением уровня NF-kb/p65 в крови по сравнению с исходным фоном. Параллельно, наблюдалась нормализация экспрессии нейротрофинов, VDR, NF-kB р50/р65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 по сравнению с исходным фоном. Однако, в группе пациенток, получавших только СИОЗС, редукция баллов шкал депрессии и тревожности составляла 58-59% и была в 2-2,3 раза выше по сравнению с группами пациенток, получавших СИОЗС в сочетании с витамином D3, или СИОЗС в комбинации с витамином D3 плюс МГТ. Таким образом, результаты проведенного пилотного клинического исследования позволяют сделать заключения о том, что оптимальным вариантом ведения пациенток в возрасте 35-45 лет, страдающих климактерическим синдромом и клинически подтвержденными аффективными расстройствами легкой или средней степени тяжести, является совместное применение препаратов из группы СИОЗС и витамина D3 в сочетании или без МГТ в зависимости от степени тяжести психопатологии, при котором обеспечивается как стойкая нормализация функции овариальной системы, так и адекватная и полноценная коррекция депрессивных расстройств.

Публикации

1. Д.А. Бараненко, Ю.О. Федотова, А.М.Дж. Ван ден Тол Vitamin D3 attenuates anxiety-like behavior in long-term ovariectomized with unpredictable mild stress Biocell, 2019 43(4): 299-311 (год публикации - 2019) https://doi.org/10.32604/biocell.2019.08407

2. Кошкина А.В., Дудниченко Т.А., Бараненко Д.А., Федотова Ю.О., Драго Ф. Effects of Vitamin D3 in Long-Term Ovariectomized Rats Subjected to Chronic Unpredictable Mild Stress: BDNF, NT-3, and NT-4 Implications Nutrients, 11(8), pii: E1726 (год публикации - 2019) https://doi.org/10.3390/nu11081726

3. Ю.О. Федотова, Д.А. Денисенко Экспериментальная оценка комбинированного применения эсциталопрама и витамина D3 у овариоэктомированных крыс Экспериментальня и клиническая фармакология, - (год публикации - 2020)

4. Булкрайн М.С., Федотова Ю.О., Колодязная В.А., Микале В., Драго Ф., Ден Тол А.Дж.М.В., Бараненко Д.А. Vitamin D and depression in women: a mini-review Current Neuropharmacology, 2020, 18, 288-300 (год публикации - 2019) https://doi.org/10.2174/1570159X17666191108111120

5. Ю.О. Федотова, Т.А. Дудниченко, Ж.В. Береза Плейотропные эффекты витамина D3 у женщин Экспериментальная и клиническая фармакология, - (год публикации - 2020)

6. А.В. Кошкина, О.В. Волкова, Ю.О. Федотова Vitamin D3 modulates NF-kB/ p65, 17β-estradiol, and Vitamin D receptors expression at estrogen deficiency Chapter in Book "Vitamin D deficiency", IntechOpen, London, England, Published: October 16th 2019 (год публикации - 2019) https://doi.org/10.5772/intechopen.89357

Аннотация результатов, полученных в 2020 году
Согласно заявке на 2020 г., была выполнена сравнительная оценка уровня ангедонии, тревожности и депрессивности, а также изменений поведенческого статуса у овариоэктомированных (ОЭ) самок крыс среднего возраста (12-14 месяцев) с экспериментальной моделью менопаузы на разных сроках ее развития (через 1, 3 или 6 месяцев) на фоне введения витамина D3 в разных дозах (1,0, 2,5, 5,0 мг/кг, подкожно) одного или в сочетании с низкой дозой 17β-эстрадиола (17β-E2, 0,5 µг/кг, подкожно) в условиях хронического непредсказуемого умеренного стресса (ХНУС) в течение 28 дней. Кроме того, был проведен сравнительный фармакологический анализ степени эффективности комбинированного введения разных селективных ингибиторов обратного захвата серотонина (СИОЗС) (флуоксетин, эсциталопрам и пароксетин в дозе 10,0 мг/кг, внутрибрюшинно) в сочетании с витамином D3 или в сочетании с витамином D3 и низкой дозой 17β-E2 у ОЭ самок крыс среднего возраста с экспериментальной моделью менопаузы на разных сроках ее развития (через 1, 3 или 6 месяцев) в условиях ХНУС. Параллельно, у всех экспериментальных групп животных была проведена оценка уровня половых тропных и периферических гормонов, кортикостерона, а также концентрации витамина D3 в сыворотке крови; оценка уровня моноаминов и их метаболитах в гиппокампе; уровней нейротрофических факторов (BDNF, NT-3 и NT-4) и уровня провоспалительного фактора (NF-kB р50/p65) в гиппокампе; уровней экспрессии BDNF, NT-3, NT-4, рецепторов к витамину D3 (VDR), NF-kB р50/p65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 в гиппокампе. Антиангедоническое действие витамина D3 или его сочетанное введение с СИОЗС определяли в тесте предпочтения сахарозы (до начала создания модели хронического непредсказуемого умеренного стресса и после); антидепрессивные эффекты – в тесте Порсолта; анксиолитическое действие – в тестах приподнятый «крестообразный» лабиринт и «черно-белая» камера; способность к адаптации в новых условиях – в тесте на гипофагию; поведенческие реакции (двигательная и исследовательская активности, груминговый компонент и реакция новизны) – в тесте «открытое поле». Методом стандартного иммуноферментного анализа определяли значения концентраций ФСГ, ЛГ, ДГЭА, кортикостерона, прогестерона, эстрадиола и 25-ОН-витамина D3 в сыворотке крови. С использованием иммуноферментного метода ELISA оценивали количество BDNF, NT-3, NT-4 и NF-kB р50/65 и с помощью метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) проводили определение уровней моноаминов и их метаболитов (НА, ДА, СА, 3,4-МГФГ, ГВК, ДОФА, 5-ГИУК) в гиппокампе. С помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (Real-time PCR) и Вестерн блоттинга (Western blotting) определяли экспрессию BDNF, NT-3, NT-4, VDR, NF-kB р50/p65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 в гиппокампе. Результаты экспериментов показали, что через 1 месяц у ОЭ самок среднего возраста с экспериментальной моделью климакса в условиях ХНУС, только низкая доза (1,0 мг/кг, подкожно) витамина D3 проявляла антиангедонический, антидепрессивный и анксиолитический эффекты, а также повышала способность к адаптации животных в новых условиях, двигательную и исследовательскую активность. При сочетанном введении витамина D3 в дозе 1,0 мг/кг и 17β-E2 отмечалось синергическое антиангедоническое, антидепрессивное и анксиолитическое действие этих препаратов у ОЭ самок среднего возраста с экспериментальной моделью климакса в условиях ХНУС. Средняя (2,5 мг/кг, подкожно) и высокая (5,0 мг/кг, подкожно) дозы витамина D3, напротив, повышали уровень ангедонии и тревожно-депрессивноподобного поведения у ОЭ самок среднего возраста с экспериментальной моделью климакса в условиях модели ХНУС. При сочетанном введении витамина D3 в этих дозах и 17β-E2 не наблюдалось каких-либо достоверных изменений в антиангедоническом, антидепрессивном и анксиолитическом действии гормонального препарата у ОЭ самок среднего возраста с моделью ХНУС, т.е. показатели тревожно-депрессивного поведения у этих животных не отличались от таковых в группе крыс, получавших только 17β-E2. Позитивный эффект низкой дозы витамина D3 на тревожно-депрессивный статус у ОЭ самок среднего возраста с экспериментальной моделью климакса в условиях ХНУС сопровождалось восстановлением уровня ФСГ, ЛГ, ДГЭА, прогестерона, эстрадиола, снижением уровня кортикостерона и повышением уровня витамина D3 в сыворотке крови; нормализацией обмена моноаминов, повышением уровней BDNF и NT-3/NT-4, а также снижением концентрации NF-kB/р65, при одновременном восстановлении экспрессии BDNF, NT-3, NT-4, VDR, NF-kB р50/p65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 в гиппокампе. На основании полученных данных об эффектах разных доз витамина D3 у ОЭ самок среднего возраста с экспериментальной моделью климакса в условиях ХНУС (введение витамина D3 с СИОЗС или введение витамина D3 с СИОЗС и 17β-E2) в качестве терапевтически эффективной дозы нами была выбрана низкая доза (1,0 мг/кг, подкожно) витамина D3. На фоне введения различных СИОЗС (флуоксетин, пароксетин и эсциталопрам) в сочетании с витамином D3 в низкой дозе было установлено, что их в комбинация проявляло более выраженное антиангедоническое, анксиолитическое и антидепрессивное действие, а также более эффективно корректировало молекулярно-биохимические параметры (уровень половых гормонов и кортикостерона и витамина D3 в сыворотке крови, уровень моноаминов и их метаболитов, концентрацию нейротрофических факторов (BDNF, NT-3 и NT-4) и уровня провоспалительного фактора (NF-kB р50/p65) в гиппокампе, степень экспрессии BDNF, NT-3, NT-4, VDR, NF-kB р50/p65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 в гиппокампе) у ОЭ самок среднего возраста в условиях ХНУС по сравнению с таковыми показателями у ОЭ самок, получавших только СИОЗС. Причем, сочетанное использование эсциталопрама или пароксетина с витамином D3 (1,0 мг/кг, подкожно) и 17β-E2 приводило к кумулятивному действию фармакологических препаратов, что вызывало полное устранение тревожно-депрессивного профиля и других поведенческих нарушений, обусловленных моделью ХНУС у ОЭ самок среднего возраста. При введении флуоксетина (10,0 мг/кг, внутрибрюшинно) в сочетании с витамином D3 и 17β-E2 нами не было обнаружено усиления антидепрессивного/анксиолитического эффектов флуоксетина у ОЭ самок среднего возраста в условиях ХНУС. Через 3 или 6 месяцев были получены сходные результаты, которые не отличались от таковых через 1 месяц. Таким образом, результаты настоящего исследования свидетельствуют о том, что что наиболее эффективная доза витамина D3 для коррекции тревожно-депрессивного статуса у ОЭ самок среднего возраста с моделью ХНУС среди исследуемых нами доз является низкая доза. Комбинация всех исследуемых СИОЗ в сочетании с низкой дозой витамина D3 проявляет максимальный терапевтический эффект на тревожно-депрессивный профиль у ОЭ самок среднего возраста с моделью ХНУС. На фоне дополнительного применения 17β-E2 наибольшим терапевтическим потенциалом обладает комбинация эсциталопрама или пароксетина в сочетании с витамином D3 в низкой дозе у ОЭ самок среднего возраста с моделью ХНУС. Использование флуоксетина в сочетании с витамином D3 в низкой дозе и 17β-E2 нецелесообразно, поскольку не приводит к кумулятивному эффекту у ОЭ самок среднего возраста с моделью ХНУС. Согласно плану проекта в 2020 г. мы провели пилотное клиническое исследование, посвященное анализу степени выраженности аффективных манифестаций у пациенток среднего возраста (46-55 лет) с клинически подтвержденным психиатрическим диагнозом «аффективное расстройство депрессивного спектра» по МКБ-10, а также с диагносцированным климактерическим синдромом разной степени выраженности в стадии перименопаузы. Пациентки с разными психиатрическими диагнозами и климактерическим синдромом, получавшие стандартную психотропную терапию с препаратами из группы СИОЗС (эсциталопрам, пароксетин, сертралин, флувоксамин в зависимости от диагноза) в сочетании только с низкими дозами витамина D3 (10000-20000 МЕ в зависимости от уровня витамина D3 в крови) или с добавлением препаратов менопаузальной гормонотерапии (МГТ), преимущественно клайра. Для детальной оценки выраженности депрессивного расстройства применялась шкала Гамильтона (Hamilton Rating Scale for Depression, HDRS21), состоящая из 21 пункта, и шкала Монтгомери-Асберга (Montgomery-Asberg Depression Rating Scale, MADRS), и шкала тревожности Шихана (ShARS Scale). Методом иммуноферментного анализа с использованием тест-наборов in vitro (Хема-Медика, DRG, Вектор-Бест) определяли значения концентраций ФСГ, ЛГ, ДГЭА, прогестерона, эстрадиола, 25-ОН-витамина D3 в крови. Кроме того, с помощью метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) проводили определение уровней моноаминов и их метаболитов (НА, ДА, СА, ДОФА, 5-ГИУК) в суточной моче и крови у всех экспериментальных групп женщин в возрасте 46-55 лет. С использованием иммуноферментного метода ELISA с использованием тест-наборов оценивали количество BDNF, NT-3, NT-4 и NF-kB р50/65 в крови. С помощью метода Real-time PCR и Western blotting определяли экспрессию BDNF, NT-3, NT-4, VDR, NF-kB р50/р65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 в крови. Спустя 6 месяцев экспериментальной терапии, снижение аффективной симптоматики у пациенток, получавших СИОЗС в сочетании с витамином D3, составила 85-87%, в то время как в группе пациенток, получавших СИОЗС в сочетании с витамином D3 плюс МГТ она достигала 89-91% от исходных значений (p<0,05). Причем, у пациенток, получавших СИОЗС в сочетании с витамином D3 плюс МГТ, значения показателей тестирования тревожно-депрессивного статуса были даже ниже по сравнению с таковыми значениями у контрольной группы (здоровые волонтеры). Уменьшение параметров тревожности и депрессии у пациенток в возрасте 46-55 лет, получавших СИОЗС в сочетании с витамином D3 в низких дозах, или СИОЗС в комбинации с витамином D3 в низких дозах плюс МГТ, сопровождалось нормализацией уровня половых гормонов, концентраций кортизола и витамина D3, увеличением уровней нейротрофинов в крови и падением уровня NF-kb/p65 в крови по сравнению с исходным фоном. Помимо этого, также отмечалась коррекция экспрессии нейротрофинов, VDR, NF-kB р50/р65, глюкокортикоидных рецепторов и рецепторов к 17β-E2 по сравнению с исходным фоном. Однако, в группе пациенток, получавших только СИОЗС, снижение баллов шкал депрессии и тревожности составляла 57-59% и была в 2-2,5 раза выше по сравнению с группами пациенток в возрасте 46-55 лет, получавших СИОЗС в сочетании с витамином D3, или СИОЗС в комбинации с витамином D3 плюс МГТ. Таким образом, результаты проведенного пилотного клинического исследования позволяют сделать заключения о том, что наилучшим вариантом терапии пациенток в возрасте 46-55 лет, страдающих климактерическим синдромом и клинически подтвержденными аффективными расстройствами легкой или средней степени тяжести, является совместное применение препаратов из группы СИОЗС и витамина D3 в низких дозах в сочетании или без МГТ в зависимости от степени тяжести психопатологии, при которой происходит комплексная коррекция состояния гипофизарно-овариальной системы и редукция тревожно-депрессивных манифестаций.

Публикации

1. Миронова В., Федотова Ю. Modulation of depression-like behavior by a combination with Vitamin D3 and 17β-estradiol in middle-aged ovariectomized rats subjected to chronic mild stress Opera Medica et Physiologica, V. 7 (2), 30-53 (год публикации - 2020) https://doi.org/10.24411/2500-2295-2020-0004

2. Федотова Ю. Different effects of fluoxetine and paroxetine combined with Vitamin D3 in ovariectomized rats exposed to unpredictable stress Open Biology Journal, V. 8, 29-46 (год публикации - 2020) https://doi.org/10.2174/1874196702008010029

3. Бараненко Д.А., Федотова Ю.О. Антидепрессивные эффекты витамина D3 у овариоэктомированных крыс среднего возраста в условиях непредсказуемого умеренного хронического стресса Сборник тезисов докладов Шестой Междисциплинарной конференции "Молекулярные и Биологические аспекты Химии, Фармацевтики и Фармакологии", С. 136 (год публикации - 2020)

4. Дудниченко Т., Береза Ж., Федотова Ю. Adjunctive vitamin D therapy promotes efficacy of selective serotonin inhibitors in perimenopausal women with mild depressive disorders European Neuropharmacology, V. 40, Suppl. 1, S163-S164 (год публикации - 2020) https://doi.org/10.1016/j.euroneuro.2020.09.214

5. Федотова Ю., Береза Ж., Дудниченко Т. Efficacy of escitalopram in combination with vitamin D3 supplementation in the depressed perimenopausal women European Psychiatry, V. 63, Suppl. 1, S110-111 (год публикации - 2020) https://doi.org/10.1192/j.eurpsy.2020.5

6. Федотова Ю., Пивина С. Low dose of cholecalciferol induces antidepressant-like effect in the middle aged ovariectomized female rats treated with 17β-estradiol European Neuropsychopharmacology, V. 29, Suppl. 1, S. 85-86 (год публикации - 2019) https://doi.org/10.1016/j.euroneuro.2018.11.1068

7. Федотова Ю.О., Дудниченко Т.А., Ченцова А.В., Бараненко Д.А. Эффективность применения селективных ингибиторов обратного захвата серотонина в комбинации с витамином D3 у перименопаузальных женщин с клиническим диагнозом аффективное расстройство Сборник тезисов докладов Шестой Междисциплинарной конференции "Молекулярные и Биологические аспекты Химии, Фармацевтики и Фармакологии", С. 110 (год публикации - 2020)

8. Ченцова А.В., Федотова Ю.О. Витамин D3 потенцирует антидепрессивный эффект эсциталопрама у овариоэктомированных крыс среднего возраста на модели непредсказуемого умеренного хронического стресса Сборник тезисов докладов Шестой Междисциплинарной конференции "Молекулярные и Биологические аспекты Химии, Фармацевтики и Фармакологии", С. 249 (год публикации - 2020)

9. - Ученые уточнили причины возникновения депрессии у женщин РИА новости (ria.ru), Ученые выяснили, что недостаток витамина D является лишь одним из факторов возникновения депрессии у женщин, а не главной причиной, как считалось раньше. (год публикации - )

10. - Климактическая угроза: витамин D снизит стресс и продлит фертильность Известия (iz.ru), Российские медики составили алгоритм приема холекальциферола для женщин в период менопаузы (год публикации - )

Возможность практического использования результатов
Результаты, полученные в ходе выполнения данного проекта, могут быть уже сейчас использованы для внедрения в клиническую практику новых алгоритмов терапии клинически подтвержденных аффективных расстройств у перименопаузальных женщин, имеющих в анамнезе дефицит витамина D3.