Аннотация результатов, полученных в 2017 году
Работы, выполненные в отчетный период, и научные результаты, полученные в 2017-2018 годах, связаны с изучением действия электрохимически активированного (ЭХА) водного раствора на дезинтеграцию бактериальной пленки, сформированной на внутренней поверхности циркуляционного реактора, моделирующего условия трубопровода (молокопровода). Биопленка формировалась из планктонной формы кишечной палочки и/или композиции молочнокислых бактерий. Отметим сложную архитектуру биопленки, которая состоит, по крайней мере, из трех уровней. Трудно оценить количество микроорганизмов в образце, но визуально клетки в основном потоке крупнее, чем в застойной зоне. Различие в размере, возможно, отражает более эффективную доставку субстрата и кислорода основным потоком. Анализ препаратов внутренней поверхности трубки реактора показывает, что молочнокислые бактерии образуют верхний слой биопленки, который полностью удаляется католитом. Нижний слой биопленки насыщен кишечной палочкой. Концентрация клеток E.coli в области основного потока гораздо меньше, чем в застойной зоне. По-видимому, ограниченность доступа потока в застойную область обусловило снижение качества дезинтеграции биопленки. Важным критерием качества очистки является наличие остаточных следов дезинфицирующего агента, что особенно актуально для застойных зон. Наши исследования показывают, что в зависимости от промывающего раствора на внутренней стенке трубки реактора остаются микровключения разной морфологии. Структуры таких размеров не визуализируются обычными методами наблюдения особенно внутри закрытого объема. Эффективность удаления биопленки оценивают двумя основными критериями: кинетическими характеристиками процесса, а также качеством разрушения клеточной компоненты и матрикса. Для наблюдения в интерактивном режиме роста и дезинтеграции бактериальной пленки разработана, изготовлена и введена в эксплуатацию оптическая ячейка. Изделие реализовано в виде разборного устройства многоразового использования или одноразовой ячейки-чипа. Применение данного устройства позволило в любом интервале времени наблюдать весь процесс под световым микроскопом. Контроль эффективности разрушения биопленки проводили несколькими взаимодополняющими методами. Изменение тонкой структуры образца изучали посредством сканирующей электронной микроскопии. Сравнение архитектуры препарата показывает, что качество отмывки поверхности зависит от способа обработки. На микрофотографии контрольного препарата нельзя различить виды молочнокислых бактерий, но плотная многослойная упаковка свидетельствует о наличии зрелого матрикса. Полное удаление клеточной компоненты под действием католита свидетельствует о его значительном дезинфицирующем эффекте, но на поверхности остаются микронные частицы матрикса. Наличие остаточной органической массы служит причиной заселения объекта de novo микроорганизмами. Представляет интерес формирование и дезинтеграция пленки, образованной композицией молочнокислых бактерий и кишечной палочки. Человек и E.coli сосуществуют в симбиозе, присутствие микроорганизма служит показателем санитарного неблагополучия производства. При обработке католитом основная масса бактериальной пленки удаляется, но на ее дне возле поверхности трубки остаются фрагменты клеток, напоминающие кишечную палочку. Этот факт объясняется тем, что сцепление E.coli с относительно мягкой поверхностью трубки из ПВХ обусловлено не только адгезией, но и механическим закреплением посредством нитевидного придатка. Принадлежность оставшихся клеток и клеточных остатков проверяли методом PCR-RT анализа, что служит критерием эффективности удаления биопленки, в состав которой входит кишечная палочка. Другими словами, оценивали наличие на стенке ПВХ трубки гена uidA, уникального для E.coli, который не встречается у эволюционно родственных видов или родов бактерий и не имеет близких гомологов в геномах бактерий других родов. В результате показано наличие на внутренней поверхности трубки циркуляционного реактора кишечной палочки, остаточный уровень загрязнения которой обусловлен способом отмывки бактериальной пленки. С позиции изучения дезинфицирующих свойств раствора, было оправдано использовать кишечную палочку в качестве тест-объекта. В отличие от молочнокислых бактерий, у клетки E.coli присутствует полезное качество - дополнительный механизм крепления к поверхности из пористого материала. Поэтому для дезинтеграции биопленки, содержащей эту бактерию, дезинфицирующий раствор должен обладать более универсальными свойствами, чем при удалении пленки из молочнокислых бактерий. Удаление клеточной компоненты необходимое, но не достаточное условие для полного разрушения бактериальной пленки. Важной структурной компонентой микробиологической колонии является внеклеточный матрикс, в состав которого входят, в основном, полисахариды, а также белки, протеогликаны, гликолипиды, внеклеточные нуклеиновые кислоты. Остаточный слой матрикса, толщиной несколько десятков нанометров, модифицирует свойства поверхности подложки, что способствует быстрой регенерации биопленки. К сожалению, метод сканирующей электронной микроскопии не позволяет визуализировать такие однородные биоорганические слои. Данная задача может быть решена посредством молекулярного анализа чистоты поверхности на основе масс-спектрометрии вторичных ионов биомолекул. С этой целью использовали метод ToF-SIMS (time-of-flight secondary ion mass spectroscopy), который позволяет анализировать тончайший слой биоорганического материала толщиной несколько десятков нанометров. Полная дезинтеграция матрикса приведет к появлению молекулярного спектра ПВХ трубки, на которой формируется биопленки. Возможно, ЭХА раствор вызывает химическую модификацию материала поверхностного слоя отмытой трубки поэтому, сравнили молекулярные спектры чистой трубки, трубки после обработки католитом и трубки, у которой пленку, сформированную молочнокислыми бактериями, дезинтегрировали католитом. Сравнительный анализ показывает практически полное совпадение спектров трубки перечисленных образцов. Данный факт свидетельствует о полной дезинтеграции под действием католита биопленки, сформированной молочнокислыми бактериями. Конечно, методы SEM, PCR-RT или ToF-SIMS нельзя рассматривать в качестве повседневной практики лабораторного анализа на производстве. Однако перечисленные подходы молекулярно-генетического анализа, наряду с ультраструктурным контролем, необходимы для оценки эффективности новых методов дезинфекции. Цель отчетного этапа заключалась в том, чтобы в контролируемых условиях лабораторного эксперимента получить воспроизводимые результаты дезинтеграции биопленки. Затем, используя накопленные данные постараться подобрать режим обеззараживания ЭХА раствором модельного трубопровода сложной конфигурации с застойными зонами. Полученные данные наглядно демонстрируют изменения в структуре биопленки в зависимости от способа обработки. Выраженную дезинтеграцию бактериальной пленки показывает католит, фракция ЭХА водного раствора. Эффект носит специфический характер, когда удаляется только фракция молочнокислых бактерий. Удаление бактериальной пленки, сформированной в присутствии кишечной палочки, наблюдается при последовательном воздействии обеих фракций ЭХА раствора, католита и анолита. Суммируя, перечислим основные полученные научные результаты: (1) создана модификация лабораторного стенда с целью моделирования формирования и дезинтеграции биопленки в турбулентном потоке с застойными зонами; (2) созданы две версии оптической ячейки для интерактивного наблюдения роста и разрушения биопленки в световом микроскопе; (3) показано на ультраструктурном уровне, что католит оказывает дезинфицирующий эффект на пленку, сформированную молочнокислыми бактериями; (4) разработана методика PCR-RT контроля эффективности дезинтеграции бактериальной пленки по критерию наличия остаточного генетического материала в виде одиночных клеток и клеточных фрагментов E.coli; (5) предложен подход (ToF-SIMS) для молекулярного анализа следов матрикса бактериальной пленки на внутренней поверхности трубки; (6) показан выраженный эффект последовательного действия анолита и католита на биопленку, сформированную молочнокислыми бактериями и E.coli; (7) в научных изданиях, индексируемых в базах данных «Сеть науки» (Web of Science Core Collection) или «Скопус» (SCOPUS) опубликовано две статьи, еще две рукописи проходят этапы рецензирования; в научных изданиях, учитываемых в базе данных «РИНЦ», вышло 5 публикаций; на международных конференциях представлено 3 доклада; результаты интеллектуальной деятельности оформлены в виде заявки ноу-хау (ИТЭБ РАН) и заявления о выдаче патента Российской Федерации на полезную модель (ФИПС).

Аннотация результатов, полученных в 2018 году
Работы, выполненные в отчетный период, и научные результаты, полученные в 2018-2019 годах, связаны со сравнительным изучением действия ЭХАР на бактериальную пленку, сформированную на поверхности керамзитовой гранулы, моделирующей условия парникового производства. Низкая чувствительность биопленки к известным антимикробным средствам и способам дезинфекции приводит к заражению технологических линий, заболеваниям растений, порче сельскохозяйственной продукции в процессе хранения и переработки. Значительное увеличение доз препаратов и/или времени обработки не оправдывает себя не только из-за их относительной неэффективности, но и по причине вреда, наносимого окружающей среде. В связи с этим актуальным представляется создание средств обеззараживания широкого спектра действия, не наносящих вреда окружающей среде. Заманчиво использовать электрохимически активированные водные растворы, которые относят к категории «зеленых» технологий, не наносящие урон экологии. Однако введение в практику качественно новых подходов заставляет изучать их реальную эффективность. В случае дезинтеграции биопленки критическим параметром является разрушение клеточной компоненты и матрикса. Отметим сложное пространственное строение пористого материала, что упрощает формирование биопленки, но значительно усложняет ее дезинтеграцию. Бактериальную пленку формировали на поверхности пористой гранулы гидропонного покрытия (элемент тепличного производства) в контролируемых условиях лабораторного эксперимента, для чего разработали специальный реактор. Источником биопленки служила водная суспензия, содержащая планктонную форму бактерий (бифидобактерии и/или кишечная палочка). Выбор микроорганизмов обусловлен следующими обстоятельствами. Для формирования пленки бактерии используют два основных механизма: адгезию и механическое закрепление посредством специальных клеточных устройств (жгутик, псевдоподия, вырост цитоплазматической мембраны, ворсинка). Используемая нами композиция микроорганизмов моделирует указанные механизмы. Молочнокислые бактерии относят к группе представителей микрофлоры, формирующих биопленку посредством адгезии. Соответственно, кишечная палочка закрепляется на поверхности за счет дополнительного механического сцепления с микрорельефом с помощью жгутика. Помимо моделирования различных способов формирования биопленки, выбор видов микроорганизмов для эксперимента обусловлен технологическими причинами. В их ряду необходимость удаления кишечной палочки (патогенные штаммы), которая может быть внесена в тепличное хозяйство водой из системы полива. В этом случае эффективность разрушения Е. coli в составе пленки определит безопасность выращиваемой растениеводческой продукции. Молочнокислые бактерии попадают в тепличное хозяйство в виде биоудобрений, которые используют в растениеводстве, например в составе консорциума «эффективных микроорганизмов». Сканирующая электронная микроскопия в сочетании с разработанной технологией формирования бактериальной пленки показала себя в качестве эффективного инструмента для визуализации тонкого строения биопленки, выращенной на поверхности пористого материал. Исследование тонкого строение рельефа поверхности биопленки, выращенной на гидропонной грануле, выполнены на базе ЦКП «Структурно-функциональные исследования биосистем» (ИТЭБ РАН, г. Пущино). С тем, чтобы унифицировать процедуру получения пленки, использовали доступные препараты (Колибактерин, Бификол), рекомендованные Минздравом РФ в качестве источников пробиотических микроорганизмов. Оба препарата содержат лиофильно высушенные живые бактерии кишечной палочки М-17 (ГКПМ № 240418), ДНК которых использовали как генетический маркер (ген uidA E.coli) на наличие в образце клеток или их фрагментов (PCR-RT анализ). Указанный ген уникален для данного микроорганизма, т.к. не встречается у эволюционно родственных видов или родов бактерий и не имеет близких гомологов в геномах бактерий других родов. Полученные данные показывают, что генетический материал E.Coli обнаружен в исходной бактериальной пленке (контроль). В образцах, обработанных потоком ЭХАР, количество ДНК было на пределе чувствительности метода, что указывает на эффективность разрушения клеточной компоненты бактериальной пленки. Удаление клеточной компоненты необходимое, но не достаточное условие для полного разрушения бактериальной пленки. Важной структурной компонентой микробной колонии является внеклеточный матрикс, который выполняет трофическую и информационную функцию. Остаточный слой матрикса толщиной несколько десятков нанометров, модифицирует поверхность подложки, что служит аттрактором для быстрой регенерации биопленки. Задача молекулярного анализа наличия следов матрикса решена посредством масс-спектрометрии вторичных ионов биомолекул методом ToF-SIMS (time-of-flight secondary ion mass spectroscopy). Появление молекулярного спектра подложки после удаления с ее поверхности биопленки свидетельствует о полном удалении следов матрикса. В этой части исследования проводили в ЦКП «Анализ химических, биологических систем и природных материалов: масс-спектральная микроскопия и фемтосекундная лазерная микроскопия-спектроскопия» (ИХФ РАН, г. Москва). Анализ данных показывает, что на поверхности гранулы всех образцов остался биоорганический слой. Таким образом, обработка пористого образца потоком ЭХАР не дала полного удаления бактериальной пленки. Метод ToF-SIMS анализа поверхности не может быть применен в качестве повседневного метода производственной лаборатории. Однако молекулярный анализ, наряду с морфологическим контролем, может быть рекомендован при тестировании эффективности новых подходов, разработанных для разрушения биопленки на поверхности. Данные ToF-SIMS согласуются с результатами визуального наблюдения ультраструктуры поверхности гранулы и генетического анализа. Отметим то, что в проекте не была поставлена задача достижения абсолютной дезинфекции пористой поверхности. Такое требование не соответствует условиям и технологиям тепличного производства. Однако факт разрушения клеточной компоненты бактериальной пленки потоком ЭХАР говорит о профилактической возможности удаления патогенной флоры, в случае заражения гидропонных покрытий, например при поливе. В результате ультраструктурного анализа показана сложная многослойная архитектура бактериальной пленки, сформированной на поверхности керамзитовой гранулы. Объемная структура гранулы качественно отличается от плоской поверхности труб из ПВХ, что обусловило разную эффективность действия ЭХАР. В случае бактериальной пленки, образованной микроорганизмами с разными механизмами прикрепления к поверхности, еще раз подтвердилось преимущественное аккумулирование на нижнем уровне клеток E.coli, обладающих жгутиками (пилями). На верхнем уровне закрепляются клетки молочнокислых бактерий, которые при обработке ЭХАР удаляются в первую очередь. Полезным устройством для наблюдения роста и дезинтеграции бактериальной пленки является оптическая проточная ячейка, которая позволяет изучать процессы в интерактивном режиме. В данной работе ячейка, разработанная ранее, была модифицирована, в результате чего появились новые полезные свойства. Помимо дополнительного удобства при работе на световом микроскопе, ячейка стала многоразовой и конструктивно реализована возможность извлекать подложку с биопленкой с целью визуализации ее ультраструктуры (сканирующая электронная микроскопия) и проведения аналитических исследований. В течение отчетного периода на международных научных мероприятиях представлено 3 доклада: IV Международная научно-практическая конференция «Инновационные технологии в области генетики, селекции, семеноводства и размножения растений», приглашенный устный доклад "ЭКОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД УДАЛЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ПЛЕНКИ С ПОВЕРХНОСТИ", 06.09.2018 г., - Ялта, Никитский ботанический сад – Национальный научный центр РАН. ХIII Международная научная конференция "АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ФИЗИКИ И ХИМИИ БФФХ - 2018", СЕКЦИЯ 4. БИОФИЗИЧЕСКАЯ ЭКОЛОГИЯ, приглашенный устный доклад "Electrochemically reduced water removes biofilm formed with lactic bacteria", 19.09.2018 г., - Севастополь, Севастопольский государственный университет. XVII Всероссийский конгресс диетологов и нутрициологов, секция 9. Совместный симпозиум Российского научного фонда и Российской академии наук "Фундаментальные исследования в стратегии управления качеством и безопасностью пищевой продукции", приглашенный устный доклад "Формирование бактериальной пленки в системе транспорта жидкости, моделирующей трубопровод", 29.10.2018 г., - Москва, Рэдиссон САС Славянская. По итогам представления полученных результатов на секции 9 совместного симпозиума РНФ и РАН в рамках XVII Всероссийского конгресса диетологов и нутрициологов материалы для обсуждения их научной общественностью размещены на информационных ресурсах Еженедельной газеты научного сообщества ПОИСК (https://www.poisknews.ru/magazine/40122/) и Официальном сайте Российского научного фонда (http://rscf.ru/ru/node/est-nevredno-uchenye-sosredotochilis-na-kachestve-produktov).

Аннотация результатов, полученных в 2019 году
Выполненные работы и полученные научные результаты в отчетный период связаны с изучением действия метастабильных фракций электрохимически активированного водного раствора (ЭХАР) на бактериальную пленку, сформированную на поверхности тест-объекта, который моделирует плодоовощную продукцию. Проблема обусловлена тем, что формирование бактериальной пленки приводит к заражению и, в результате, к порче сельскохозяйственной продукции (плодов, овощей, фруктов, ягод, цветов и т.д.). С учетом резистентности биопленки к дезинфицирующим препаратам, использование их в высоких концентрациях и/или увеличение длительности обработки может привести к накоплению бактерицидов и их переносу по пищевой цепочке. Поэтому актуальным представляется использовать ЭХАР, который обладает широким бактерицидным спектром действия и экологически безопасен. При выполнении проекта на основе плотного геля разработан тест-объект, который воспроизводит основные физико-химические свойства поверхности плодоовощной продукции. В их ряду: наличие микрорельефа и микропор, плотность (~10% сухого остатка), влажность (~90% воды), состав основных электролитов (~100 мМ К+, ~5 мМ Na+), вязко-упругие свойства (гель), растительный полимер в качестве основной компоненты матрицы. Рост пленки инициировали нанесением на поверхность агарового геля планктонной формы микроорганизмов в виде капли водной суспензии доступного препарата, который рекомендован в качестве биологически активной добавки к пище — источника пробиотических микроорганизмов. С целью унификации условий формирования бактериальной пленки в процессе отработки методики подготовки проб провели генетический анализ нескольких коммерческих препаратов, содержащих штамм E.coli. В состав отобранного препарата входят также молочнокислые бактерии. Бинарная система указанных видов микроорганизмов обеспечивает оба механизма (адгезию, механическое сцепление), используемых бактериями для закрепления на поверхности. В результате получали биопленку в виде отдельных кластеров, каждый из которых включает в себя несколько бактериальных колоний. Подложка из плотного агарового геля с заданными параметрами и бинарная система клеток позволили создать условия, моделирующий рост бактериальной пленки на поверхности плодоовощной продукции. Для дезинтеграции бактериальной пленки, сформированной на поверхности тест объекта, разработан и введен в эксплуатацию действующий лабораторный стенд, который обеспечивает обработку поверхности субмикронными частицами аэрозоля в среде «сухой туман». С целью визуализации ультраструктуры бактериальной пленки, сформированной на поверхности тест объекта, разработана методика подготовки препарата для сканирующей электронной микроскопии. Данный подход может быть распространен на другие объекты, свойства которых соответствуют характерным признакам мягких биологических тканей растительного происхождения. Используя разработанную методику, проведено сравнительное изучение на ультраструктурном уровне клеточного состав и матрикса бактериальной пленки поверхности на тест объекта в процессе ее деградации в потоке жидкости и в среде субмикронных частиц «сухой туман». Ультраструктурный анализ показал сложную многослойную архитектуры колонии, сформированную двумя видами бактерий. На нижнем уровне находятся клетки E.coli, над ними накапливаются молочнокислые бактерии, от внешней среды колонию отделяет барьерная пленка. Электронная микроскопия относится к классу трудоемких методов, которые используют для визуализации уникальных образцов и ситуаций, но редко применяют для массовых лабораторных исследований. Поэтому эффективность удаления бактериальной пленки ЭХАР определяли также PCR-RT методом, который разработан для генетического экспресс теста. В нашем случае оценивали наличие гена кишечной палочки в образцах тест объекта, что служит критерием полноты дезинтеграции биопленки, в состав которой входит данная бактерия. Ген uidA является уникальным для E.coli, так как не встречается у эволюционно родственных видов или родов бактерий и не имеет близких гомологов в геномах бактерий других родов. Чтобы подготовить препарат, с поверхности тест объекта срезали колонии бактерий с тонким слоем подлежащего агарового геля, который растворяли в дистиллированной воде, а суспензию клеток и их фрагментов исследовали посредством PCR-RT анализ, используя праймеры, специфичные к ДНК кишечной палочки. Полученные данные показывают, что клетки кишечной палочки и/или ее фрагменты остаются во всех исследованных образцах, что подтверждает данные ультраструктурных наблюдений. Отметим, следы ДНК в пробе после действия ЭХАР не означает наличия живых бактерий, так как используемый вариант PCR-RT идентифицирует весь пул нуклеиновых кислот, включая клеточные фрагменты и инактивированные микроорганизмы. Обязательным структурным элементом микробиологической колонии является внеклеточный матрикс, основная функция состоит в том, чтобы формировать архитектуру биопленки, снабжать бактерии питательными веществами, регулировать внутренний гомеостаз, обеспечивать обмен генетической информацией. Отсутствие следов матрикса может служить признаком полного удаления бактериальной пленки, а не только ее клеточной составляющей. Поэтому был применен метод молекулярной спектрометрии (ToF-SIMS) тонких слоев биоорганического материала. Для данного метода разработана методика подготовки препарата тест объекта и затем получен масс-спектр, который содержит несколько десятков пиков, что свидетельствует о сложном молекулярном составе анализируемого препарата, т.е. о наличии остатков всех структурных элементов бактериальной пленки. Такой результат предсказуем и не противоречит данным ультраструктурного наблюдения и также генетического анализа. Конечно, молекулярная спектрометрия в версии ToF-SIMS, как и электронная микроскопия, не применима в качестве повседневного метода анализа в производственных условиях. Однако молекулярный анализ, наряду с ультраструктурным контролем, может быть востребован при тестировании новых методов дезинфекции. Удачным примером служит комплексное исследование дезинтеграции бактериальной пленки, сформированной на внутренней поверхности системы циркуляционного реактора (модель трубопровода). Возможно, отсутствие на поверхности ПВХ трубки крупного рельефа и пористости обусловило полное удаление бактериальной пленки. Наличие застойных зон, например пор на поверхности керамзитовых гранул (модель гидропонного покрытия в тепличном производстве), снижает качество любой дезинфицирующей обработки. В данном случае фрагменты микроорганизмов и матрикса, оставшиеся после обработки бактериальной пленки, делают молекулярный анализ не результативным. Основная цель этапа заключалась в том, чтобы в контролируемых условиях испытательного стенда исследовать режим дезинтеграции бактериальной пленки, сформированной на поверхности тест объекта, в среде частиц ЭХАР. К сожалению, в электростатическом поле высокой напряженности метастабильная фракция воды очень быстро теряет свои уникальные свойства. Поэтому, для производства аэрозоля воды применили метод «сухой туман», основанный на ультразвуковой генерации субмикронных частиц. Однако под действием ультразвука ЭХАР также стремится восстановить состояние исходной воды, например, для замкнутого объема у/з обработка в течение 15 минут меняет окислительно-восстановительный потенциал католита с -760 мВ до +2000 мВ, а анолита с +800 мВ до +700 мВ. Поэтому необходимо в конструкции испытательного стенда учесть условие непрерывного потока свежего ЭХАР. Обсуждая режим дезинтеграции бактериальной пленки в среде «сухого тумана», следует также учитывать фактор агрегации частиц аэрозоля, что вызывает конденсацию влаги. Опыт исследования дезинтеграции биопленки, сформированной на гидропонном покрытии, показал, что некорректно ставить задачу абсолютной дезинфекции поверхности пористого материала посредством ЭХАР. Данная проблема, возможно, решается отжигом материала при высоких температурах, что в цикле производства и хранения не приемлемо для плодоовощной продукции. Притом, что характеристики ее поверхности (рельеф, микропоры, вязкоупругие свойства) и наличие оводненной биологической матрицы, обогащенной субстратом, способствует автономному от внешней среды формированию бактериальной пленки. Полученные результаты показывают основные тенденции дезинтеграции бактериальной пленки, сформированной на поверхности тест объекта, в результате обработки аэрозолем ЭХАР в виде «сухой туман». Наиболее эффективный режим реализуется при действии аэрозоля католита с последующей обработкой аэрозолем анолита. При этом католит удаляет поверхностную пленку колонии, играющую роль барьера от внешней среды, и разрыхляет межклеточный матрикс, что облегчает диффузию анолита в тело биопленки с последующим разрушением микроорганизмов. Следует отметить, что не удается полностью удалить бактериальную пленку, причиной чего является прорастание колонии бактерий вглубь подложки (10% агаровый гель). Такой эффект обусловлен, возможно, наличием микропор на поверхности тест объекта и/или его вязко упругой консистенцией. Таким образом, факт разрушения бактериальной пленки аэрозолем ЭХАР говорит о профилактическом потенциале данного вида обработки. По-видимому, такой вид экологически безопасной дезинфекции поверхности будет особенно востребован применительно к такой нежной продукции, как ягоды, листья салата, плоды с тонкой кожурой, а также лепестки цветов. Во многом выраженность эффекта дезинтеграции зависит от зрелости бактериальной пленки и особенностей конкретного вида плодоовощной продукции и продуктов растениеводства. В течение отчетного периода на научных конференциях представлено три устных доклада, четвертый доклад перенесен в связи с объективными обстоятельствами; в научных изданиях, индексируемых в базах данных «Сеть науки» (Web of Science Core Collection), «Скопус» (SCOPUS) и РИНЦ, опубликовано шесть работ, в т.ч. монография. Результаты интеллектуальной деятельности: 10.01.2020 опубликован патент № 194989 (заявл. № 2018116021 от 27.04.2018), 28.01.2020 подано заявление о выдаче патента на полезную модель № 2020103420